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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 50T西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測(cè)試劑盒
對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測(cè)試劑盒
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 分類(lèi) | 貨號(hào) |
西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10362 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線(xiàn)
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線(xiàn),即為擴(kuò)增曲線(xiàn)。熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)一般分為基線(xiàn)期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線(xiàn)期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線(xiàn)性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
雪白鏈霉菌微生物代謝調(diào)控研究模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 39生長(zhǎng)條件: 28℃
ATCC201178外源基因高效穩(wěn)定表達(dá)模式菌株: no種屬: Pichia│pastoris提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 312生長(zhǎng)條件: 30℃
-411℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
海洋桿菌培養(yǎng)基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
香菇培養(yǎng)基: 0014食用、藥用提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
灰色鏈霉菌生長(zhǎng)條件: 28C培養(yǎng)基: CM0012提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 真空冷凍干燥
擬諾卡氏菌屬菌種環(huán)境模式菌株: no鹽土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0237生長(zhǎng)條件: 28C
白靈菇食用菌模式菌株: no朽木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 17生長(zhǎng)條件: 20℃
豬丹絲菌血清定性模式菌株: no丹豬提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 396生長(zhǎng)條件: 37
-412℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
蘇云金芽孢桿菌培養(yǎng)基: 141害蟲(chóng)生物防治提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28 定期移植法
黑曲霉培養(yǎng)基: CM0077以淀粉為原料檸檬。提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法
鼠疫耶爾森氏菌生長(zhǎng)條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0132提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no 真空冷凍干燥法
盧森坦海旋菌培養(yǎng)基: 4711.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質(zhì)篩選;4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
葡萄穗霉屬培養(yǎng)基: CM0018產(chǎn)生Glauconic acid or Glaucanic acid提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28C -80℃冰箱凍結(jié)
大腸埃希菌分類(lèi)學(xué),形態(tài)研究,教學(xué)使用。模式菌株: no斑羚腸道提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37
酚pxenolAR500g
E801-100GL-metxionine L-甲硫安 (蛋安)63-68-3100g40
F0127-250GD-Fructose D-果糖57-48-7250g
Hematoxylin Staining Solution
次甲基綠 (亞甲基綠)5g
十六烷HexadecaneGCS2ml
ER1642SatI (Fnu4HI)1000 units3
BK186-500GBetaine xy7nochloride 鹽甜菜堿500g
甲酚紅5g
玉米素10mg
大鼠氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 ,英文名: OxLDL ELISA Kit
人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit 96T/48T
大鼠Toll樣受體9(TLR9)免疫試劑盒 Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA kit
CLIAKitforsRANKL(Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand)ELISAKit人可溶性核因子κB受體活化因子配基規(guī)格:48T/96T
人血液胰島素免疫比濁法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitAgrin人聚集蛋白規(guī)格:48T/96T
西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測(cè)試劑盒鳥(niǎo)氨脫羧酶肉湯 (霍亂)規(guī)格:20支詳情介紹
含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)顆粒規(guī)格:250g拉丁屬名:Trypticase Soy-Yeast ExtractAgar
改良纖維二糖-多粘菌素B-多粘菌素E瓊脂基礎(chǔ)(MCPC)規(guī)格:纖維二糖詳情介紹
胭脂紅(靛藍(lán))規(guī)格:10g用途:微生物指示劑
YSG培養(yǎng)基基礎(chǔ)(日本標(biāo)準(zhǔn))規(guī)格:250g用途:用途:用于清汁、濁汁、水和濃縮果汁中耐、耐熱菌的檢測(cè)。
TSA表面接觸皿(6.5cm)規(guī)格:10個(gè)/包用途:用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無(wú)菌檢測(cè)
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