當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T狂犬病毒(RV)核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
狂犬病毒(RV)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10360 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
黃色赤桿菌培養(yǎng)基: 821南大西洋細(xì)菌水樣/熱液羽流提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
寬松環(huán)單頂孢培養(yǎng)基: 18模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25-28℃
豬布魯氏菌用于科研及血清定型模式菌株: no豬病料提供形式: 凍干物安全等級: 3培養(yǎng)基: 401生長條件: 37
暗球腔菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no水中腐木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法;其他
大腸埃希菌研究,分析其生物學(xué)活性模式菌株: no牛糞便提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
-400℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
球孢白僵菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no幼蟲提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法
猴頭菌(猴頭蘑、刺猬菌)培養(yǎng)基: CM0835食用提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25~28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法
195-75分型血清 非O1 VBO-60模式菌株: no種屬: Vibrio│cholerae non-O1提供形式: 凍干物安全等級: 3培養(yǎng)基: CM0116生長條件: 37℃
解脂假絲酵母培養(yǎng)基: CM0013利用石油產(chǎn)蛋白。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法
ATCC51281培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no種屬: Pseudomonas│marginalis提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
虎皮牛肝菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
-401℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
勞地毛霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
小孢矛束霉生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no
#膠質(zhì)芽孢桿菌溶磷模式菌株: no油松土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: Potass生長條件: 28-30
二錄化錫Tin dichlorideAR500g
ST-150-SS1.5 ml 螺口可立凍存管(無色)(無蓋)125
G0625-100GD-Galactose D-半乳糖59-23-4100g
吉姆薩染色劑50ml
metxyl violet25g
乳乙酯etxyl LactateGCS2ml
SM0241GeneRuler 100bp DNA Ladders199
A0486-100GAmmonium Persulfate [APS] 過流銨7727-54-0100g
Coomassie® Brilliant Blue R-250100g
Yeast nitnogen Base without Amino500g
大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 ,英文名: OxLDL ELISA Kit
人抗神經(jīng)母瘤抗體(NB-Ab)ELISA檢測試劑盒Humanai-neuroblastoma-aibody,NB-AbELISAKit 96T/48T
大鼠Toll樣受體4(TLR4)免疫試劑盒 Rat toll-like receptor 4,TLR4 ELISA Kit
CLIAKitforSR(Humansecretieceptor)ELISAKit人促胰液素/分泌素受體規(guī)格:48T/96T
人血液載脂蛋白B(APOLIPOPROTEINB)免疫比濁法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitMIF人巨噬移動抑制因子規(guī)格:48T/96T
狂犬病毒(RV)核酸檢測試劑盒糖蜜素規(guī)格:1EA詳情介紹
M-腸道菌瓊脂規(guī)格:250g用途:用于水中或其它物質(zhì)中腸球菌分離培養(yǎng)和計數(shù)(濾膜法或劃線法)
HBI副溶血性弧菌生化鑒定條(SN)規(guī)格:5條/盒用途:用于副溶血性弧菌的生化鑒定,每條包括:無鹽胨水、3%NaCl胰胨水、7%NaCl胰胨水、10%NaCl胰胨水、3%NaClVP半固體、賴氨脫羧酶、精氨脫羧酶、氨基脫羧酶對照、O/F試驗(2孔)、蔗糖發(fā)酵管、42℃生長共12種生化反應(yīng)。(SN標(biāo)準(zhǔn))
色氨肉湯規(guī)格:20支詳情介紹
Letheen瓊脂規(guī)格:250g用途:用于化妝品中微生物檢測
亞硫鐵多粘菌素B瓊脂規(guī)格:250g用途:用于羽絨羽毛中亞硫鹽還原梭狀芽孢桿菌的計數(shù)(GB 標(biāo)準(zhǔn))
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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