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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 50T犬瘟熱病毒(CDV)核酸檢測(cè)試劑盒
對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測(cè)試劑盒
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
犬瘟熱病毒(CDV)核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10358 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
黃傘生長(zhǎng)條件: 25培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no 定期移植法
核盤菌生長(zhǎng)條件: 25培養(yǎng)基: 14菌核提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no 定期移植法
-395℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
ATCC-VR1392模式菌株: yes安全等級(jí): 3種屬: 諾拉彈狀病屬│病料提供形式: 凍存管基礎(chǔ)研究培養(yǎng)基: MEM+5%FBS
ATCC10559=NRRLY-1415用于酒精發(fā)酵。模式菌株: no種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 25℃
蘇云金芽胞桿菌培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no1-5cm土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
教酒鏈霉菌培養(yǎng)基: 820模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
煙草生長(zhǎng)條件: 30℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no
AS01飼料模式菌株: no種屬: Candida│tropicalis提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 13生長(zhǎng)條件: 28℃
-396℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
芽孢桿菌分類學(xué)研究模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 37℃
多殺性巴氏桿菌科研及血清定型模式菌株: no出血性敗血癥水牛提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 56生長(zhǎng)條件: 37
棒狀桿菌培養(yǎng)基: CM0117模式菌株: no乳房積膿提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2生長(zhǎng)條件: 36℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
鏈霉菌屬菌種抗金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌11模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C
副溶血弧菌培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no南美白對(duì)蝦提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
金針菇培養(yǎng)基: CM0017用于食用菌。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法
4-(二甲安基)本甲4-(dimetxylamino) penzel7exy7eAR25g
E2129埃文斯藍(lán)314-13-61g34
G0625-25GD-Galactose D-半乳糖59-23-425g
福林酚100ml
metxyl Red25g
耐nepxtxeleneGCS5g
SM0243GeneRuler 100bp DNA Ladder, ready-to-use206
B0500-10GBarbital,wo7ium 鈉
Coomassie® Brilliant Blue G-250100g
Yeast nitnogen Base without Amino500g
大鼠陽離子基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(CAT2)ELISA試劑盒 ,英文名: CAT2 ELISA Kit
Duck ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
Mouse1,3-βDglucosidaseELISAKit 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanComplemefragme4a,C4aELISAKit人過敏素/補(bǔ)體片斷4規(guī)格:48T/96T
CaMKIV激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitGAD-Ab大鼠谷氨脫羧酶自身抗體規(guī)格:48T/96T
犬瘟熱病毒(CDV)核酸檢測(cè)試劑盒葡萄糖(腦膜炎奈瑟氏菌)規(guī)格:20ml/支詳情介紹
月桂基硫鹽蛋白胨肉湯-MUG規(guī)格:1000ml用途:用于O157菌檢測(cè),(GB標(biāo)準(zhǔn))
桿菌肽藥敏紙片規(guī)格:0.04IU/片,20片/瓶拉丁屬名:Bacitracin (B)
腦心浸出液肉湯(BHI)顆粒規(guī)格:250g用途:用于細(xì)菌的增菌培養(yǎng)或純化培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
產(chǎn)氣莢膜梭菌顯色培養(yǎng)基規(guī)格:1000ml用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的顯色培養(yǎng)
化鈉結(jié)晶紫增菌液規(guī)格:250g用途:用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
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