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RARα激動劑(AM580)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 16:28:55瀏覽次數(shù):148次

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貨號 FS-X10595
RARα激動劑(AM580)正在熱銷的產(chǎn)品:TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 腫瘤壞死因子-β抗原二, 含穩(wěn)定劑銅屑, 98%
TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗原N,N-二酰 98%
TP53(tumor protein p53; Li-Fraum

中文名稱:RARα激動劑(AM580)

英文名稱:AM580

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X10595

產(chǎn)品介紹:

AM580是一種穩(wěn)定的retinobenzoic衍生物,是RARα的激動劑。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:102121-60-8

別名:CD336;NSC608001;Ro 40-6055

純度:99.41%

分子量:351.44

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

大腸桿菌突觸結(jié)合蛋白12抗體Anti-PRLR Antibody角蛋白14(KRT14)

蕈青霉大腸桿菌志賀樣Ⅱ型突變體(O139菌型)抗體Anti-PRLR Antibody角蛋白13(KRT13)

高溫紫鏈霉菌泛連接Siah1抗體Anti-PRMT1 Antibody角蛋白12(KRT12)

褐球固氮菌磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體Anti-PRMT5 Antibody角蛋白10(KRT10)

鐮刀菌屬磷化5-脂氧合抗體Anti-PRMT1 Antibody角蛋白1(KRT1)

高加索奶乳桿菌磷化5-脂氧合抗體Anti-PRND Antibody焦磷2(PPA2)

柱黃曲霉應(yīng)激誘導(dǎo)分泌蛋白1抗體Anti-PRMT8 Antibody焦磷1(PPA1)

松口蘑抗腫瘤蛋白ANUP抗體Anti-PRNP Antibody膠質(zhì)系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1(GFRα1)

賴芽胞桿菌屬小谷酰三角四肽重復(fù)區(qū)蛋白α抗體Anti-PRNP Antibody膠質(zhì)成熟因子γ(MPFγ)

巨大芽孢桿菌SUGT1蛋白抗體Anti-PRNP Antibody膠乳(LXN)

糞腸球菌紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白3抗體Anti-PRNP Antibody(PB0833)降鈣受體(CTR)

金灰青霉紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白2抗體Anti-PROC Antibody腱調(diào)蛋白(TNMD)

雞傷門氏菌轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM1抗體Anti-PROC Antibody腱蛋白樣蛋白1(CHRDL1)

球孢白僵菌核轉(zhuǎn)錄因子SOX14抗體Anti-PROCR Antibody腱蛋白(CHRD)

釀酒酵母信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Anti-PROM1 Antibody堿性唾液脯豐富蛋白2(PRB2)

巨大芽孢桿菌 A核轉(zhuǎn)錄因子SOX6抗體Anti-PROK1 Antibody堿性唾液脯豐富蛋白1(PRB1)

胚胎神經(jīng)細(xì)胞NNAT抗體痰塔特姆氏菌小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物

神經(jīng)肽Y受體5抗體科氏葡萄球菌科氏亞種小鼠主動脈平滑肌細(xì)胞提取物

神經(jīng)肽Y受體4抗體單形擬桿菌小鼠腸微血管細(xì)胞提取物

螺旋環(huán)螺旋蛋白1+2抗體假結(jié)合棒桿菌小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物
RARα激動劑(AM580)細(xì)交鏈孢 硝鎂,六水單氧化

異常畢赤酵母 三氧化二鈦絲蛋白抑制劑

枯草芽孢桿 2-氨基-2'-氟-2'-脫氧腺MAP激相互作用的絲;蘇激

皮諾卡氏 一氧化錳磷化MAP激相互作用絲,蘇激

桃色枝頂孢 硅幾丁質(zhì)

新月彎孢 2,3-二氟苯甲尿核輔

長孢鏈霉 (1S)-(-)-樟腦烷尿核輔

黃絮鱗鵝膏 甲鈷甘氨酰脯二肽氨基肽

運動替斯崔納 4--2-膽固

水棲黃桿 11-疊氮-3,6,9-三氧雜十一烷-1-胰島樣生長因子1

檸檬色短小桿 6,7-二氫-4-苯并[b]噻吩酮總蛋白

葡萄座腔 三(4-三氟甲苯基)膦1磷鞘氨

近緣彎孢 5'-O-[(二異基氨基)-(2-基乙氧基)氧磷基]-3'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)胸異檸檬脫氫

木糖氧化無色桿 Fmoc-(2-芐氧基羰基)賴磷

牛病性腹瀉病 2-亞氨基生物琥珀脫氫

 


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