當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光探針法>> 48T 0.1PCR管Cry1A(b/c)基因核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
Cry1A(b/c)基因核酸檢測試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10715 |
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
小單孢菌培養(yǎng)基: 0027代謝產(chǎn)物具有抗真菌活性。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
紅灰鏈霉菌培養(yǎng)基: 12可用于抗菌活性及抗腫瘤活性研究土壤/近海紅樹林土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1467℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
表皮葡萄球菌培養(yǎng)基: CM0109模式菌株: no痰提供形式: 凍干物安全等級: 2生長條件: 36℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
毛霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
AS3.4267培養(yǎng)基: 311模式菌株: no種屬: Aspergillus│ustus提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法
玉蜀黍黑粉菌培養(yǎng)基: 0017遺傳分析 17D4, a2b4提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法
豬呼吸與繁殖綜合征病分類和研究模式菌株: no血清提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
普利莫耶鹵地海單胞菌培養(yǎng)基: 471微生物/耐冷菌沉積物/表層沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 15℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1468℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
奧默畢赤酵母生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0013提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
尖鐮孢古巴專化型(香蕉枯萎病菌)生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no
鬼傘菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
巨獸芽孢桿菌用于降磷微生物研究模式菌株: no馴化活性污泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃
產(chǎn)黃青霉生長條件: 27℃培養(yǎng)基: 0015提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基: 33生物防治研究提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
隱丹參酮NK-2R peptide 神經(jīng)激肽A受體(多肽抗原)Zyxin/ESP 2 斑聯(lián)蛋白抗體
丹參素鈉Calpain 1 鈣蛋白酶(多肽)ZWINT 著絲粒ZW10相互作用蛋白1抗體
冬凌草甲素Tanis/SELS (Selenoprotein S)又稱SELS 炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白(抗原)ZWILCH 著絲粒ZWILCH蛋白抗體
輔酶Q10Tau protein 微管相關(guān)蛋白(抗原)ZW10 peptide 著絲粒蛋白抗體
粉防己堿漢防己甲素Telomerase (TE) 端粒酶(催化亞單位)(多肽抗原)ZSWIM3 ZSWIM3蛋白抗體
防己諾林堿漢防已乙素TGF-Alpha (Ttansforming Growth Factor –Alpha) 轉(zhuǎn)移生長因子–α(抗原)ZSWIM2 E3泛素蛋白連接酶ZSWIM2抗體
鬼臼素CaMK2a(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II alpha) 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗原ZPI/SERPINA10 絲氨蛋白酶抑制劑A10抗體
標(biāo)準(zhǔn)品Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗原ZO-1 胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體(閉鎖小帶蛋白1)
葛根素TGF- Beta1 (Ttansforming Growth Factor – Beta1) 轉(zhuǎn)移生長因子–β1(抗原)ZnT-1 鋅轉(zhuǎn)運蛋白1抗體
黃芪總皂苷CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita) 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗原ZNRF4 鋅指/環(huán)指蛋白4抗體
Cry1A(b/c)基因核酸檢測試劑盒Adefovirdipivoxil 阿德福韋/阿德福韋酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
R-PramipexoleDihydrochlorideMonohydrate R-鹽普拉克索 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
Clozapine 氮平 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
Clozapine 氮平(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)
Enrofloxacin 恩諾沙星 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)
Enrofloxacin 恩諾沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)
EnrofloxacinHCL 鹽恩諾沙星 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)
EnrofloxacinHCL 鹽恩諾沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)
Zolmitriptan 佐米曲普坦 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
Thymosinalpha1Acetate 胸腺肽alpha1 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
Tegafur 替加氟 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
Tegafur 替加氟(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
Acipimox 阿昔莫司,阿西莫司 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
Acipimox 阿昔莫司,阿西莫司(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
Adapalene 阿達帕林 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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