當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T小反芻獸疫病毒(PPRV)核酸檢測試劑盒
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
小反芻獸疫病毒(PPRV)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10356 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
刺囊殼培養(yǎng)基: 0014分解纖維素提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結法;礦物油法
匍枝根霉(黑根霉)生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
酵母菌培養(yǎng)基: 436模式菌株: no土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;其他
木霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 14植物果實提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物模式菌株: no 真空冷凍干燥法;定期移植法
鏈霉菌屬菌種抗恥垢分支桿菌模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C
副流感病研究模式菌株: no病雞提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
-391℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077食用酵母提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結法
地中海馬特爾氏菌培養(yǎng)基: 471潛在的有機污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)醚富集菌群沉積物/TVG表層沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
側柄褐孔菌培養(yǎng)基: 17模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
新城疫病制備活疫苗模式菌株: no病雞提供形式: 凍干物安全等級: 3培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
鴨瘟立默氏菌家畜流行病調(diào)查模式菌株: no鴨腦提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 330生長條件: 37℃
芽孢桿菌屬菌種培養(yǎng)基: CM0002產(chǎn)生抗螟蛉抗菌素提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37C 真空冷凍干燥
-392℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
黑曲霉生長條件: 28-30℃培養(yǎng)基: CM0077提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
短桿菌培養(yǎng)基: 471潛在的新種,海洋放線菌沉積物/箱式樣品提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
兒價分橙xyleol orangeAR5g
N0364-5GpNPP4264-83-95g31
G4875-10GD(+)Glucosamine HCL D-安基葡萄糖29031-19-410g
伊紅染色液100ml
metxyl Orange25g
間二甲本M-xyleneGCS2ml
JX0201200 μl 硅化吸頭 帶濾芯袋裝179
B0885-1GBCIP, P-Toluidine salt 對甲本胺藍6578-6-91G
Congo Red25g
Yeast nitnogen Base without Amino500g
大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷磷(NADPH)ELISA試劑盒 ,英文名: NADPH ELISA Kit
人抗膜DNA抗體(cmDNA)ELISA檢測試劑盒Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNAELISAKit 96T/48T
大鼠toll樣受體1(TLR1)免疫試劑盒 Rat toll-like receptor 1,TLR1 ELISA kit
CLIAKitforsP-selectin(HumansolubleP-selectin)ELISAKit人可溶性P選擇素規(guī)格:48T/96T
人血液轉鐵蛋白(ANSFERRIN)免疫比濁法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitMIP-3β/ELC人巨噬炎性蛋白3β規(guī)格:48T/96T
小反芻獸疫病毒(PPRV)核酸檢測試劑盒MLCB寒天培地規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌分離培養(yǎng)
志賀氏菌成套生化鑒定管(ZHGB)規(guī)格:16種*1套/盒*10盒用途:用于志賀氏菌的生化鑒定。組成:葡萄糖銨1支、西蒙氏枸櫞鹽1支、鳥氨脫羧酶1支、賴氨脫羧酶1支、氨基脫羧酶對照1支、尿素酶1支、粘液鹽測試肉湯1支、粘液鹽質(zhì)控肉湯1支、水楊苷1支、七葉苷1支、半固體瓊脂1支、甘露醇1支、棉子糖1支、甘油1支、ONPG 1支、色氨肉湯1支、無菌液體石蠟1支
胰胨-亞硫鹽-環(huán)絲氨瓊脂基礎規(guī)格:250g用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計數(shù)(GB標準)
麥迪、麥白霉素檢定培養(yǎng)基(普通瓊脂斜面培養(yǎng)基)規(guī)格:250g用途:麥迪(白)霉素效價測定
產(chǎn)氣莢膜梭菌測定用培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)
BPL瓊脂規(guī)格:250g用途:用于食品中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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