您好, 歡迎來到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> oechst 33258染色液(即用型)
貨號(hào) | FS-X9826 |
---|
產(chǎn)品介紹:
細(xì)胞凋亡時(shí)產(chǎn)生顯著的變化是染色體固縮,DNA 裂解使細(xì)胞核形態(tài)產(chǎn)發(fā)生變化。熒光染料Hoechst33258 是一種無毒、水溶性雙苯咪唑類化合物,可作為熒光探針與DNA 分子結(jié)合。 在凋亡細(xì)胞中,細(xì)胞膜對(duì)Hoechst 33258 的攝取增高,并且由于染色體高度濃縮,Hoechst 33258 與之結(jié)合增強(qiáng),染色呈強(qiáng)藍(lán)色熒光,而正常細(xì)胞只呈微弱熒光,死細(xì)胞則不被染色,由此可檢測(cè)出凋亡。 操作方法(以下操作針對(duì)細(xì)胞爬片進(jìn)行) 1. 培養(yǎng)細(xì)胞并爬片; 2. 用冷PBS 洗滌細(xì)胞二次(貼壁細(xì)胞原位固定染色) 3. 加入500μL 的4%溶液(用戶自備),4℃固定細(xì)胞10-30min; 4. 洗去固定液,用PBS 洗兩遍; 5. 滴加100μL Hoechst 33258 染色液,室溫染色10 min,水沖凈晾干; 6. 滴加一滴防淬滅封片液覆蓋樣本; 7. 以紫外光340nm 波長激發(fā),發(fā)射波長為460nm,可以在熒光顯微鏡下觀察。 儲(chǔ)存:4℃,避光,有效期6個(gè)月。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
10ml|50ml | FS-X9826 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
AMPA離子能谷受體3(GRIA3)英文名:GRIA3 1號(hào)染色體開放閱讀框122抗體包裝1g
AMPA離子能谷受體2(GRIA2)英文名:GRIA2 1號(hào)染色體開放閱讀框123抗體包裝5g
ADP核糖轉(zhuǎn)移1(ART1)英文名:ART1 1號(hào)染色體開放閱讀框124抗體包裝25g
Ⅻ型膠原(COL12)英文名:COL12 2號(hào)染色體開放閱讀框3抗體包裝5g
Ⅹ型膠原(COL10)英文名:COL10 1號(hào)染色體開放閱讀框127抗體包裝25g
ⅩⅤ型膠原(COL15)英文名:COL15 1號(hào)染色體開放閱讀框129抗體包裝5g
Ⅶ型膠原(COL7)英文名:COL7 1號(hào)染色體開放閱讀框130抗體包裝25g
Ⅵ型膠原α1(COL6α1)英文名:COL6α1 1號(hào)染色體開放閱讀框131抗體包裝5g
Ⅴ型膠原α2(COL5α2)英文名:COL5α2 1號(hào)染色體開放閱讀框135抗體包裝5g
Ⅳ型膠原α1(COL4α1)英文名:COL4α1 1號(hào)染色體開放閱讀框141抗體包裝100ml
Ⅳ型膠原(COL4)英文名:COL4 1號(hào)染色體開放閱讀框144抗體包裝25ml
Ⅲ型前膠原基端原肽(PⅢNP)英文名:PⅢNP COPA蛋白抗體包裝1g
Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)英文名:CTXⅢ 1號(hào)染色體開放閱讀框185抗體包裝5g
Ⅲ型膠原(COL3)英文名:COL3 磷化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體包裝1g
Ⅱ型前膠原羧基端原肽(PⅡCP)英文名:PⅡCP 磷化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體包裝250mg
小舟單頂孢Monacrosporium│microscaphoides 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR,可用于培養(yǎng)乙脫氫18家族成員A1試劑盒8-O-乙酰山梔酯;8-O-acet
立枯絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品乙脫氫試劑盒鴨腳樹葉堿;2α,5α-Epoxy-1,
黃綠蜜環(huán)菌Armillaria│mellea 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR乙基二異鼠李-3-O-葡萄糖;Isorha
oechst 33258染色液(即用型)大豆慢生根瘤 1-甲基-4-羥甲基吡唑羥基自由基
亮白曲霉 2-氨基磺?;?N,N二甲基煙酰; 2-(Aminosulfongl)-N,N-dimethyl-艾杜糖硫酯
米曲霉 1-乙基-1H-咪唑-2-甲巨病抗體
干草寒冷桿 反式-2-壬烯甲酯趨化因子C-C-基元配體3
Sinomonas flave (R)-(+)-3-氨基四對(duì)苯磺鹽半胱蛋白抑制劑1
蘇云金芽孢桿 油酰乙觸珠蛋白
假諾卡氏 1-甲基-3-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧乙酯半胱蛋白抑制劑1
地衣芽孢桿 6-溴-2-喹唑啉-4-幽門螺旋桿
平菇 1H-苯并三唑-1-乙5磷核糖1焦磷
釀酒酵母 Dowex 50WX8-100離子交換樹脂5磷核糖1焦磷
枯草芽孢桿 2-氨基-5-氟-6-1,2-棕櫚酰磷酯酰肌-4-磷
黑曲霉 5-乙酰氧基-6-溴-2-溴甲基-1-甲基-3-甲乙酯酪蛋白激ABL1
大腸埃希 ML-7止血環(huán)
糙皮側(cè)耳 甲基帕羅抗Laminaribioside糖抗體
食油假單胞 聯(lián)二脲抗Chitobioside糖抗體
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。