產(chǎn)品介紹:

中文名稱：SMYD3和MEKK2抑制劑(EPZ031686)

英文名稱：EPZ031686

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào)：FS-X10662

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

橄欖綠鏈霉菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XPC Antibody叢狀蛋白C1(PLXNC1)

青春雙歧桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XPO1 Antibody叢狀蛋白B3(PLXNB3)

海藻希瓦氏菌PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XPO5 Antibody叢狀蛋白B2(PLXNB2)

圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淡色變種堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC1 Antibody叢狀蛋白B1(PLXNB1)

豬屎豆根瘤菌FITC標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC1 Antibody叢狀蛋白A4(PLXNA4)

雜色曲霉羅丹明標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC1 Antibody叢狀蛋白A3(PLXNA3)

蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC3 Antibody叢狀蛋白A2(PLXNA2)

美澳型核果褐腐病菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-XRCC2 Antibody叢狀蛋白A1(PLXNA1)

豬丹絲菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC3 Antibody猬因子相互作用蛋白(HHIP)

雅致栓孔菌Cy7標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC4 Antibody(PB0954)猬?；D(zhuǎn)移(HHAT)

東方伊薩酵母羅丹明標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-Xrcc4 Antibody核糖基轉(zhuǎn)移1(HPRT1)

白淺灰鏈霉菌FITC標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC2 Antibody雌(E1)

納瓦河部落奇異球菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC5 Antibody雌激受體相關(guān)受體α(ERRα)

綠色鏈霉菌膠體金標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC5 Antibody(PB0411)雌激受體β(ERβ)

小孔異擔(dān)子菌Cy3標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC5 Antibody雌激受體α(ERα)

洛格酵母Cy5標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-YBX1 Antibody垂體腫瘤轉(zhuǎn)化1相互作用蛋白(PTTG1IP)

磷化絲/蘇/酪抗體嗜鹽細(xì)菌屬小鼠脈絡(luò)膜組織提取物

核仁同源蛋白17抗體睪丸叢毛單胞菌小鼠角膜組織提取物

蛋白酪磷相互作用蛋白51抗體新鞘單胞菌小鼠腦靜脈血管組織提取物

前列腺相關(guān)P抗原家族成員1抗體蜃樓耶爾森氏菌小鼠嗅鞘組織提取物
SMYD3和MEKK2抑制劑(EPZ031686)豬鏈球 2-噻吩二磷腺

假單胞 1,3-二溴-2-煙酰腺二核磷

橡膠疫霉 (±)-2-氨基-1-丁煙酰腺二核

地衣芽孢桿 1,2,3-三溴烷NADH

克魯維尼爾巴克利酵母 4-間苯二結(jié)核病

非洲黑蛋巢 2-氨基-4-煙酰腺二核磷

南類芽孢桿 4-鄰苯二單純皰疹病抗原1

大腸埃希氏桿 7-氨基頭孢霉烷巴氏桿抗體

海洋伍斯 2--1,4-二坦唑

淡紫褐鏈霉 (R)-4-異基-2-惡唑烷酮過氧化氫

七角井鹽單胞 苯并噻唑Toll樣受體4

靈芝 苯并噻吩腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6

果生鏈核盤 茚腺病

德里腐霉 (R)-(+)-1,1,2-三苯基-1,2-乙二副流感病

曲霉 三[2-苯基吡啶-C2,N]銥(III)狂犬病抗原