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貨號 | FS-X10423 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:BMS-202 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg BMS-202是PD-1/PD-L1蛋白-蛋白相互作用抑制劑,主要用于抗癌研究。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1675203-84-5 別名:PD-1/PD-L1 inhibitor 2 純度:99.63% 分子量:419.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱:PD-1/PD-L1蛋白相互作用抑制劑
英文名稱:BMS-202
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10423
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
綠色木霉磷脂酰肌激p85β抗體Anti-BMP5 Antibody(PB0729)α黑色激(α-MSH)
枯草芽孢桿菌磷化磷脂酰肌激p85β抗體Anti-BMP5 AntibodyαS轉(zhuǎn)移(α-GST)
簡單青霉磷化蛋白磷2C亞型α抗體Anti-BMP7 Antibodyα干擾(IFN-α)
釀酒酵母三磷腺受體受體P2X2抗體Anti-BMP6 Antibody(PB0730)α輔肌動蛋白4(ACTN-4)
釀酒酵母磷化樁蛋白Paxillin抗體Anti-BMPR1A Antibodyα-輔肌動蛋白3(ACTN-3)
枯草芽孢桿菌多型性腺瘤基因1蛋白抗體Anti-BMPR1B Antibodyα輔肌動蛋白3(ACTN-3)
二年輕泰坦桿菌撲克蒙蛋白抗體Anti-BMPR1B Antibody(PB0556)α輔肌動蛋白1(ACTN-1)
PET28a-TEVP抗體Anti-BMPR2 Antibodyα防御4(NP-4)
傳染性牛鼻氣管炎病絲/蘇激蛋白PIM1+PIM3抗體Anti-BNIP3 Antibodyα淀粉(AMY1)
光隧霉北里孢菌胞漿蛋白PACSIN3抗體Anti-BRAF Antibodyα淀粉(AMS/AMY)
黑曲霉跨膜接頭蛋白PAG抗體Anti-BNIP3 Antibodyα半乳糖基抗體(Gal)
根瘤菌PARD6G蛋白抗體Anti-BRAF Antibodyα半乳糖基(α-Gal)
頂青霉胎盤蛋白6抗體Anti-BRCA1 Antibodyα半乳糖(αGAL)
盧森坦類諾卡氏菌磷肌3激接頭蛋白1抗體Anti-BRCA1 AntibodyαN已?;咸?αNAG)
豬丹絲菌PRAM1蛋白抗體Anti-BRCA2 AntibodyαL巖藻糖(AFU)
皮落青霉廣譜角蛋白PCK抗體Anti-BRCA1 Antibody(PB0016)αL艾杜糖(IDUA)
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
棲珊瑚假交替單胞菌Pseudoalteromonas│paragorgicola 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
PD-1/PD-L1蛋白相互作用抑制劑棒孢擬盤多毛孢 二苯氨基-4-苯甲生長釋放
癬囊腔 1-甲基咪唑-5-甲核連蛋白2
解淀粉芽孢桿 2,4-二溴噻唑β-防御2
竹蓀D優(yōu)1號 2,4-二噻唑血清總補體
副豬嗜血桿 2-溴噻唑-5-羧乙酯信號6B
農(nóng)研所溶桿 (R)-2-甲基吡咯烷過氧化物1
胡椒枯萎病 2-硝基二苯硫半乳糖
分枝節(jié)桿 5,6-二煙基質(zhì)金屬蛋白抑制因子
大腸埃希 4-乙酰氧基-2, 5-二甲基 -3-呋喃酮基質(zhì)金屬蛋白10
枯草芽孢桿 4-酮糖原合成激3β
柯達酵母屬 氘代-d5腺活化蛋白激
靈芝 1,4-二溴苯-d4?;D(zhuǎn)移
Paraburkholderia sp. β-D-半乳糖五乙酯二氧化
熒光假單胞 球蛋白輕鏈lambda
釀酒酵母 間二芐硫球蛋白輕鏈kappa
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