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survivin抑制劑(YM-155)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 13:51:14瀏覽次數(shù):193次

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貨號 FS-X10422
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Rabbit Guinea IgM/HRP 辣根過氧化

中文名稱:survivin抑制劑(YM-155)

英文名稱:YM-155

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10422

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:YM-155

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

YM-155是一種survivin抑制劑,能夠抑制survivin啟動子的活動,IC50值為0.54nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:781661-94-7

別名:Sepantronium bromide

純度:98.0%

分子量:443.29

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

謝氏桿菌磷化蛋白激C抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)

蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)磷化蛋白激C抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)

嗜鹽棲鹽水芽孢桿菌磷化腫瘤抑制基因PTEN抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)

腸道致病性大腸埃希氏菌磷化磷脂酰肌激催化亞單位A抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白(β2-GP)

虎掌菌1號*磷化磷脂酰肌激抗體Anti-BIRC7 Antibodyβ1,4-N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移2(B4GALNT2)

德里腐霉磷化磷脂酰肌激抗體Anti-BMI1 Antibodyα烯化(αENOL)

林芝假絲酵母磷化蛋白激C抗體Anti-BMI1 Antibodyα烯化(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)

褐孢大禿馬勃磷化蛋白激C抗體Anti-BIRC7 Antibodyα突觸核蛋白(α-SYN)

微小桿菌磷化腺單磷活化蛋白激α2抗體Anti-BMP15 Antibodyα戊二脫氫(α-KGDHC)

香菇蛋白酪磷1C抗體Anti-BMP2 Antibodyα乳清蛋白(α-La)

鏈霉菌磷化蛋白酪磷1C抗體Anti-BMP4 Antibodyα葡萄糖(α-glucosidase)

矮小傘枝霉磷化蛋白酪磷1C抗體Anti-BMP2 Antibody(PB0727)α葡萄糖(α-Glu)

大腸埃希菌磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體Anti-BMP15 Antibodyα平滑肌肌動蛋白(α-SMA)

單梗頭孢霉屬磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體Anti-BMP4 Antibodyα-內(nèi)肽(α-EP)

毛尖蘑磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體Anti-BMP4 Antibodyα肌動蛋白(α Actin)

Virgibacillus磷化蛋白激C theta抗體Anti-BMP5 Antibodyα橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)

巴氏醋桿菌Acetobacter│pasteurianus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

秀珍菇Pleurotus│geesterani Singer 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,無物
survivin抑制劑(YM-155)大腸埃希 3-基-6-甲基-2-吡啶酮滋養(yǎng)層表面抗原2

谷棒桿 1-溴十七氟辛烷蛋白酪磷1B

鏈霉 全氟代丁烷顆粒B

平臍儒孢 2-溴-5-乙Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽

硬水黃桿 3,5-二乙Ⅰ型膠原交聯(lián)氨基端肽

卷曲鏈霉 己(乙根)-mu-氧三(水)三銠(III)乙鹽吡啶

膠孢 2-烯氧基四氫吡喃FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉相關(guān)蛋白

Sandarakinorhabdus 十二烷基異酯線粒體異檸檬脫氫

毛木耳 三氟化乙絡(luò)合物 溶液胞漿異檸檬脫氫

枯草芽孢桿 單β-聯(lián)蛋白

馬賽 4-溴-3-甲膽鹽磺基轉(zhuǎn)移

大腸埃希氏 二-μ-雙[5-羥基-2-[1-(肟基)乙基]苯基]鈀(II)二聚體3-酮脂酰硫解

 (S)-(-)-1-(4-)乙胞外銅鋅超氧化物歧化

釀酒酵母 N,N'-羰基二(1,2,4-三氮唑)Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2

塔賓曲霉 4-氨基-1-甲基乙酰CoA羧化

 


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