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貨號 | FS-X10366 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Vincristine sulfate 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg Vincristine sulfate是一種微管聚合抑制劑,能夠與微管蛋白結(jié)合,IC50值為32μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:2068-78-2 別名:Leurocristine sulfate;22-Oxovincaleukoblastine sulfate 純度:99.51% 分子量:923.04 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱:微管聚合抑制劑
英文名稱:Vincristine sulfate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號:FS-X10366
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
墳?zāi)构?jié)桿菌磷化核因子抗體Human ORM1(Alpha-1-acid glycoprotein 1) 巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)
賴芽孢桿菌磷化核因子抗體Human NOS2/iNOS(Nitric oxide synthase, inducible) 巨噬趨化因子(MCF)
三葉草根瘤菌磷化核因子抗體Human TNNI1(Troponin I, slow skeletal muscle) 巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)
賴芽胞桿菌屬神經(jīng)上皮轉(zhuǎn)化基因1抗體Human IL7R(Interleukin-7 receptor) 巨噬集落激因子受體(M-CSFR)
擬盤多毛孢粘附分子3抗體(脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白3)Human LGALS1(Galectin-1) 巨噬集落激因子(M-CSF)
根霉屬螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體Human FABP1(Fatty acid-binding protein, liver) 巨噬激蛋白(MSP)
球孢白僵菌胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Nodal抗體Human MAP2K1(Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1) 鹽抵抗的性磷(TRAP)
地衣芽孢桿菌增殖相關(guān)蛋白NANOS1抗體Human IL36G(Interleukin-36 gamma) 相關(guān)抗原7(SPAG7)
毛韌革菌同源盒蛋白NOBOX抗體Human SNCA(Alpha-synuclein) 精脒/精N(1)-乙酰轉(zhuǎn)移樣蛋白1(SATL1)
微球菌轉(zhuǎn)錄因子NAC1抗體Human PTK2(Focal adhesion kinase 1) 精合成(SRM)
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型神經(jīng)生長因子受體抗體Human ENPP2(Ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase family member 2) 精酰-tRNA合成(RARS)
根瘤菌磷化KB抑制蛋白激εHuman PSG1(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 1) 精脫羧(ADC)
耐鹽四聯(lián)球菌磷化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體Human NPY(Pro-neuropeptide Y) 精2(ARG2)
紫薇布勒酵母1型神經(jīng)纖維瘤抗體Human SERPINC1(Antithrombin-III) 精(Arg)
香菇磷化1型神經(jīng)纖維瘤抗體Human TNNI2(Troponin I, fast skeletal muscle) 精加壓(AVP)
枯草芽胞桿菌枯草亞種中心粒蛋白Nudel抗體Human S100B(Protein S100-B) 精(Arg)
: ivcas7.00198資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR槐果堿
: LMG5856=ATCC33914=CECT547=DSM3584=ICMP4298=NCPPB2217資源名稱: Xylophilusampelinus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR絡(luò)塞定
茯苓Poria│cocos 質(zhì)量規(guī)格:BR,4000u/g絡(luò)緦
微管聚合抑制劑大腸埃希氏 4-硝基鄰苯二甲性成纖維生長因子
球孢白僵 9,10-雙(二乙基膦甲基)蒽性磷
枯草芽孢桿 烯基三丁基錫髓過氧化物
松鼠葡萄球松鼠亞種 2-羥基煙髓鞘堿性蛋白
藤倉赤霉 γ-氨基二乙氧基硅烷髓鞘相關(guān)生長抑制因子
豬丹絲 4-羥基煙髓樣分化蛋白-2
梨形游動放線 N-(β-氨乙基-γ-氨基)甲基二甲氧基硅烷髓樣分化因子88
單色云芝 2'-氨基脫氧鳥羧化不全骨鈣
釀酒酵母 3,4-二溴甲苯羧甲基賴
彩色豆馬勃 2-硝基噻吩
人參土獨島桿 1-溴-4-叔丁氧基苯胎盤生長因子
栗疫 三氟甲磺鎳(II)碳酐9
芽孢桿屬 2,3-二溴丁二羰基化蛋白
紅曲紅曲 Tergitol TMN 3聚乙二基壬基糖化白蛋白
枯草芽孢桿枯草亞種 (3-甲氧芐基)膦二乙酯糖化蛋白
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