亚洲欧美成人第一区,久久99国产精品久久久久久久不卡,国产嫩穴一区

貨號	FS-X10769

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

中文名稱：VEGFR/FGFR/PDGFR抑制劑(尼達尼布乙磺酸鹽)

英文名稱：BIBF 1120 esylate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

貨號：FS-X10769

產(chǎn)品介紹:

BIBF1120esylate是一種有效的VEGFR1/2/3，F(xiàn)GFR1/2/3和PDGFRα/β三重抑制劑，IC50值分別為34nM/13nM/13nM，69nM/37nM/108nM和59nM/65nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：656247-18-6

別名：Nintedanib esylate

純度：99.95%

分子量：649.76

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

海洋桿菌熒光PE標(biāo)記豬胰島蛋白Anti-IKBKB Antibody人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)

蔥色串孢熒光PE標(biāo)記血藍蛋白Anti-IKZF2 Antibody人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)

釀酒酵母熒光PE標(biāo)記Anti-IKBKG Antibody人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)

單核增生科斯特氏菌熒光PE標(biāo)記胰糜蛋白Anti-IKZF3 Antibody人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)

柱狀田頭菇（茶樹菇、楊樹菇）熒光APC標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-IL11RA Antibody人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體

黑曲霉熒光APC標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對照)Anti-IL12A Antibody人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體

溶組織梭菌熒光APC標(biāo)記牛IgGAnti-IL13RA1 Antibody人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)

立枯絲核菌熒光APC標(biāo)記牛IgMAnti-IL15RA Antibody人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)

枯草芽孢桿菌枯草亞種熒光APC標(biāo)記雞IgGAnti-IL17B Antibody人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)

甘蔗鐮孢熒光APC標(biāo)記雞IgMAnti-IL17F Antibody人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)

鏈格孢熒光APC標(biāo)記狗IgGAnti-IL18R1 Antibody人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)

哈氏弧菌熒光APC標(biāo)記狗IgMAnti-IL18 Antibody人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)

辣椒枯萎熒光APC標(biāo)記羊IgMAnti-IL18RAP Antibody人抗SS-B/La抗體

長裙竹蓀熒光APC標(biāo)記豚鼠IgGAnti-IL19 Antibody人抗SS-B/La抗體

炭疽芽胞桿菌熒光APC標(biāo)記豚鼠IgMAnti-IL1B Antibody人落葉型天皰瘡抗體(PF)

食品檢測用副溶血性弧菌熒光APC標(biāo)記馬IgGAnti-IL1A Antibody人落葉型天皰瘡抗體(PF)

維甲受體G抗體紅色紅曲霉小鼠腹水瘤細胞

視網(wǎng)膜母細胞瘤樣蛋白2抗體玉蜀黍長蠕孢小鼠前胃癌低轉(zhuǎn)移細胞（綠色熒光蛋白標(biāo)記）

RANGTPase激活蛋白1抗體銀白楊盤長孢人乳腺癌細胞（紅色熒光蛋白標(biāo)記）

維甲誘導(dǎo)蛋白17抗體盤長孢菌(魯保一號)人乳腺癌細胞（上皮粘性蛋白基因修飾）
VEGFR/FGFR/PDGFR抑制劑(尼達尼布乙磺酸鹽)黃曲霉 (全氟己基)乙烯I型前膠原羧基端肽

金黃色葡萄球硝鹽培養(yǎng)基Klotho蛋白

擬莖點霉乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基NFkB誘導(dǎo)的激

蕈青霉 1/2MS培養(yǎng)基P物質(zhì)

竹黃* 厭氧培養(yǎng)液P選擇

匍枝根霉原變種 2,2,4-基-1,3-戊二單異丁酯RGD三肽

畢赤酵母屬 4-(4-嗎啉代)苯S100B蛋白

日本裂殖酵母代磷二苯酯S-腺甲硫

灰離褶傘膽鹽葡萄糖肉湯Toll樣受體2

鉛色灰球肝湯Toll樣受體4

涼山蟲草 B5培養(yǎng)基（不含瓊脂）α-平滑肌肌動蛋白

彩色豆馬勃 2-芴β2微球蛋白

塊屬* 氧化亞鐵硫桿培養(yǎng)基β半乳糖

硫藤黃鏈霉腸球顯色培養(yǎng)基β-內(nèi)啡肽

PCP20 精支原體肉湯培養(yǎng)基γ干擾
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)