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貨號 | FS-X10279 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:EPZ-6438 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg EPZ-6438抑制含人PRC2的野生型EZH2,Ki為2.5±0.5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1403254-99-8 別名:Tazemetostat;E-7438 純度:99.63% 分子量:572.74 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱:含人PRC2的野生型EZH2抑制劑
英文名稱:EPZ-6438
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號:FS-X10279
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
木霉真核翻譯起始因子4E抗體Human RAMP3 脂肪甘油三酯脂(ATGL)
壁節(jié)桿菌核蛋白4抗體(Ran結(jié)合蛋白4)Human ABCC6(Multidrug resistance-associated protein 6) 脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)
展示接霉免疫球蛋白重鏈可變區(qū)抗體Human RANBP10 脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)
彩色豆馬勃胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7抗體Human RARG 脂多糖/內(nèi)(LPS)
谷棒桿菌胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6抗體Human RANBP3L 脂多糖(LPS)
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種KB抑制蛋白激εHuman RARRES3 脂蛋白脂(LPL)
平菇(雪蓮菇)整合β4抗體Human RAD9A 脂蛋白脂肪(LPL)
乳桿菌屬磷化白介-7受體a抗體Human RAD51B(DNA repair protein RAD51 homolog 2) 脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PLA2)
梅林青霉磷化胰島受體底物-1抗體Human RADIL 脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)
副豬嗜血桿菌磷化胰島受體底物2抗體Human PTPRQ(Phosphotidylinositol phosphatase PTPRQ) 脂蛋白磷脂A2(Lp-PLA2)
枯草芽孢桿菌磷化KB抑制蛋白激β抗體Human Radixin 脂蛋白α(Lp-α)
魯氏不動(dòng)桿菌磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RAF1 脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)
賴芽胞桿菌屬磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RAE1 正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)
小單孢菌磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RAI1 整合連接激1(ILK-1)
大腸埃希菌磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RAI14 整合β4結(jié)合蛋白(ITGB4BP)
pHY300PLK磷化整合連接激1抗體Human RALA 整合αM型(ITG αM/CD11b)
: HBUM71449資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)山茱萸新
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)丁東莨菪堿
ATCC35564資源名稱: 棲麥假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)細(xì)葉遠(yuǎn)志皂
含人PRC2的野生型EZH2抑制劑枯草芽孢桿 2--6-氟苯哇巴因
金黃色葡萄球(質(zhì)控) 5-乙酰戊腸三葉因子3
菜豆間座殼 對甲苯磺鐵六水合物二肽基肽Ⅷ
嗜血苯基桿 3-氨基-5-甲基吡唑二肽基肽Ⅸ
隔離德沃斯氏 3,5-吡唑二甲組織蛋白B
球孢白僵 4-氨基-5,6-二嘧啶固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1C
燼灰土類芽孢桿 2,4,6-基-1,3-苯二乙酰
樹舌靈芝(平蓋靈芝) R-3-N-Boc-3-甲氨基NADH脫氫
枯草芽孢桿 4-苯氧基苯尿激
大腸埃希氏 2,2-二苯基環(huán)S-腺甲硫
Maritalea myrionectae 鋰糖原合成
杰丁畢赤酵母 草鋰糖原合成
白囊耙齒 正十二烷Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2
灰略紅鏈霉 2--4,6-二增值核抗原
鮑氏桑黃 (R)-(+)-1-苯胃泌釋放肽抗體
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