當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T貓傳染性腹膜炎(FIP)核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
貓傳染性腹膜炎(FIP)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10378 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
-445℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
球孢白僵菌生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no
大腸埃希氏菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: 219提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
燼灰刺孢鏈霉菌培養(yǎng)基: 0012模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
多殺性巴氏桿菌科研及血清定型模式菌株: no禽霍亂鴨提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 56生長條件: 37
微球菌共生微生物/鮑魚腸道共生菌模式菌株: no生物樣/健康鮑魚腸道提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃
枯草芽孢桿菌生長條件: 28培養(yǎng)基: 141根表提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no 定期移植法
-446℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
鏈霉菌 真空冷凍干燥法生長條件: 28℃提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 38
大麗花輪枝孢(棉花黃萎病菌)生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no
小單孢菌屬抑制真菌;具有抑制啤酒酵母的活性模式菌株: no海灘土提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 35-37C
棘孢青霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no
膠紅酵母深海酵母模式菌株: no水樣/上層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 7生長條件: 28℃
大孢硬皮馬勃生長條件: 25-30培養(yǎng)基: 14組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no 定期移植法
-447℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
鼠傷寒沙門氏菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: yes 真空冷凍干燥法
國仰化輕30%(*)30% xy7nogen peroxide (*)GR500ml
SM0431Protein Molecular Weight Marker239
A8515-5GAmylopectin 支鏈淀粉9037-22-35g
非非還原性蛋白上樣緩沖液(5X)2ml
5mg
正庚Heptane acidGCS2ml
LBD07抗人素瘤特異性抗原單抗194
V0990-500MGVancomycin xy7nochloride 鹽萬古霉素1404-93-9500mg
Cytidine25g
β-D-Glucose-1-Phosphate, Diwo7ium Salt100g
大鼠一氧化碳血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒 ,英文名: HbCO ELISA Kit
人抗中性??贵w(ANA)ELISA檢測試劑盒Humanai-neuophilaibody,ANAELISAKit 96T/48T
大鼠α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒 Rat α1-microglobulin,α1-MG ELISA Kit
CLIAKitforssDNA(humansinglesandedDNAAibody)ELISAKit人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體規(guī)格:48T/96T
人血液免疫球蛋白A(IgA)免疫比濁法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitai-IgA-Ab人抗IgA抗體規(guī)格:48T/96T
貓傳染性腹膜炎(FIP)核酸檢測試劑盒麥迪、麥白霉素檢定培養(yǎng)基(普通瓊脂斜面培養(yǎng)基)規(guī)格:250g用途:麥迪(白)霉素效價(jià)測定
草鉀兔血漿規(guī)格:0.2ml*20用途:用于溶血性鏈球菌的檢驗(yàn)
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)(mCCDA)規(guī)格:250g用途:用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
馬丁肉湯培養(yǎng)基規(guī)格:250g拉丁屬名:Martin Broth Medium
遠(yuǎn)藤氏瓊脂規(guī)格:250g用途:用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。
硫新霉素(100ug)規(guī)格:1ml/支*5用途:取一支添加于200ml亞硫鐵多粘菌素B瓊脂中
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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