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特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
Cry1A(c)基因核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光探針?lè)?/span> | FS-P10730 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
鏈霉菌屬菌種Pm631SE(Tem3)陽(yáng)性模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C
根霉培養(yǎng)基: 0014酒精根霉提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
多殺性巴氏桿菌科研及血清定型模式菌株: no巴氏桿菌病豬提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 56生長(zhǎng)條件: 37
指孢囊菌 -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法生長(zhǎng)條件: 28℃提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 38
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077釀造啤酒。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28℃ 真空冷凍干燥法;定期移植法
ATCC53618模式菌株: no安全等級(jí): 1種屬: Thiobacillus│ferrooxidans銅礦山提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 584生長(zhǎng)條件: 26℃
-1511℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
擬莖點(diǎn)霉培養(yǎng)基: 0014模式菌株: no華山松健康植株樹(shù)皮提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
擬盤多毛孢培養(yǎng)基: 0014模式菌株: no植物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 18-26℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌培養(yǎng)基: 33模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
孢囊放線菌培養(yǎng)基: 0027代謝產(chǎn)物具有抗真菌活性。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
赤細(xì)菌(加詞待譯)有機(jī)污染物降解菌/PAH降解菌,對(duì)萘,菲和柴油的降解效果良好模式菌株: no沉積物/海底沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 1001生長(zhǎng)條件: 25℃
海洋紅嗜熱鹽菌培養(yǎng)基: 471微生物/高溫菌(80℃)水樣/上層溫泉水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 80℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1512℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
米根霉培養(yǎng)基: CM0077釀酒。提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25-28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法
沙福芽孢桿菌培養(yǎng)基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
人參皂苷Rb1Cyclin D3(C-term) 周期素D3抗原V.cholera Ogawa 01群小川型霍亂弧菌抗體
人參皂苷Rb2CYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 色素P450 3A4抗原V.cholera Ogawa 01群稻葉型霍亂弧菌抗體
人參皂苷Rb3Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61) 富半胱氨肝素結(jié)合蛋白61抗原UXT/Ubiquitously expressed transcript 廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體
人參皂苷Rg1HCMV UL23/HHV5 UL23(Human Cytomegalovirus UL23 Gene) 人巨病UL23抗原UVRAG/DHTX 輻射耐受相關(guān)蛋白DHTX抗體
人參皂苷Rg2DAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原UTS2R/GPCR GPR14 G蛋白偶聯(lián)受體14抗體
人參皂苷Rg3DRD3 receptor(dopamine D3 receptor) 多巴胺受體-D3抗原UTS2D 尾加壓素2相關(guān)肽抗體
人參皂苷Rh1DRD4 receptor peptide 多巴胺受體-D4抗原UTP14A/SDCCAG16 結(jié)腸癌抗原16抗體
人參皂苷Rh2DRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受體-D5抗原Uteroglobin 珠蛋白抗體
人參皂苷Rh3DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羥化酶(抗原)USP9X 泛素特異性蛋白酶9X抗體
人參皂苷RcDCC (Deleted in colorectal cancer gene) 結(jié)直腸癌缺失基因抗原USP3 去泛素化酶3抗體
Cry1A(c)基因核酸檢測(cè)試劑盒BupivacaineHCl 鹽布比卡因(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分
ButenafineHCl 鹽布替萘芬 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分
Captopril 卡托普利 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分
Captopril 卡托普利(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分
(S)-Carbidopa 卡比多巴 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分,SigmaG9910
(S)-Carbidopa 卡比多巴(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分,SigmaT4376
ChlormadinoneAcetate 醋地孕(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分sigma貨號(hào)A3656
ChlormadinoneAcetate 醋地孕 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分TCIA2215
CiprofloxacinHCL 鹽環(huán)丙沙星 質(zhì)量規(guī)格:>97%,美國(guó)進(jìn)口
CiprofloxacinHCL 鹽環(huán)丙沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)
Cisatracuriumbesilate 順磺阿曲庫(kù)銨 質(zhì)量規(guī)格:>97%,液體
Dantrolenesodium 丹曲林鈉 質(zhì)量規(guī)格:>97%,油狀
Dantrolenesodium 丹曲林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,游離
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