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貨號 | FS-X11022 |
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產(chǎn)品介紹:
ACY-738是一種有效的,選擇性的HDAC6抑制劑,IC50值為1.7nM;同時可抑制HDAC1,HDAC2和HDAC3的活性,IC50值分別為94,128和218nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1375465-91-0 純度:99.14% 分子量:270.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:HDAC6抑制劑(ACY-738)
英文名稱:ACY-738
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X11022
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
乳乳球菌乳亞種Pseudomonas putida大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)
大腸埃希菌Pseudomonas putida大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)
三葉草根瘤菌Pseudomonas putida大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)
弗雷德里克斯堡假單胞菌Pseudomonas putida大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)
阿穆爾斯克灣鹽地桿菌Pseudomonas putida大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)
人纖維單胞菌Pseudomonas putida大鼠骨橋(OPN)
燕麥嗜菌西瓜亞種*Pseudomonas putida大鼠骨橋(OPN)
Penicillium Pseudomonas putida大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)
干巴菌*Pseudomonas putida大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)
大腸埃希菌Pseudomonas putida大鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)
季也蒙畢赤酵母Pseudomonas putida大鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)
柑橘炭疽盤孢菌Pseudomonas putida大鼠半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)
雅致放射毛霉Pseudomonas putida大鼠半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)
食砜節(jié)桿菌Pseudomonas putida大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)
粉被蟲草Pseudomonas putida大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)
美澳型核果褐腐病菌Pseudomonas putida大鼠激M2型同工(M2-PK)
α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體白阿魏菇比色法測試盒
泛樣蛋白Sumo2/3抗體鮑魚側耳BCA 蛋白濃度測定試劑盒
肺表面活性蛋白C前體肽抗體皺蓋假芝(血芝)總羰基含量比色法測試盒
Syndecan3蛋白抗體血紅栓菌總蛋白(TP)比色法測試盒(雙縮脲法)
HDAC6抑制劑(ACY-738)枯草芽孢桿 (-)-扁柏脂,蓽澄茄內脂
屎腸球 伏康京堿
灰托柄菇 對葉百部堿
產(chǎn)馬乳酒乳桿 次甲二氫丹參醌
大腸埃希氏桿 △6-去氫彌羅松
芭蕉生粘鞭霉 丹參酮
委內瑞拉鏈霉 15,16-二氫丹參二 C
香菇 15,16-二氫丹參二 B
Klebsiella pneumoniae Delta 7-avenasterol
栗疫 Delta 5-avenasterol
光滑青霉 靈芝烯C
玖紅穗狀霉 靈芝T-Q
扣囊復膜孢酵母 靈芝烯A
頂青霉 靈芝TR
嗜線蟲致病桿 13-羥基羽扇豆鹼
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