HDAC6抑制劑(ACY-738)-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號	FS-X11022

產(chǎn)品介紹:

ACY-738是一種有效的，選擇性的HDAC6抑制劑，IC50值為1.7nM；同時(shí)可抑制HDAC1，HDAC2和HDAC3的活性，IC50值分別為94，128和218nM。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：1375465-91-0

純度：99.14%

分子量：270.29

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

中文名稱：HDAC6抑制劑(ACY-738)

英文名稱：ACY-738

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號：FS-X11022

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

乳乳球菌乳亞種Pseudomonas putida大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)

大腸埃希菌Pseudomonas putida大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)

三葉草根瘤菌Pseudomonas putida大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)

弗雷德里克斯堡假單胞菌Pseudomonas putida大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)

阿穆爾斯克灣鹽地桿菌Pseudomonas putida大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)

人纖維單胞菌Pseudomonas putida大鼠骨橋(OPN)

燕麥?zhǔn)染鞴蟻喎N*Pseudomonas putida大鼠骨橋(OPN)

Penicillium Pseudomonas putida大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)

干巴菌*Pseudomonas putida大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)

大腸埃希菌Pseudomonas putida大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)

季也蒙畢赤酵母Pseudomonas putida大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)

柑橘炭疽盤孢菌Pseudomonas putida大鼠半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)

雅致放射毛霉Pseudomonas putida大鼠半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)

食砜節(jié)桿菌Pseudomonas putida大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)

粉被蟲草Pseudomonas putida大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)

美澳型核果褐腐病菌Pseudomonas putida大鼠激M2型同工(M2-PK)

α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體白阿魏菇比色法測試盒

泛樣蛋白Sumo2/3抗體鮑魚側(cè)耳BCA 蛋白濃度測定試劑盒

肺表面活性蛋白C前體肽抗體皺蓋假芝（血芝）總羰基含量比色法測試盒

Syndecan3蛋白抗體血紅栓菌總蛋白(TP)比色法測試盒(雙縮脲法)
HDAC6抑制劑(ACY-738)枯草芽孢桿 (-)-扁柏脂，蓽澄茄內(nèi)脂

屎腸球伏康京堿

灰托柄菇對葉百部堿

產(chǎn)馬乳酒乳桿次甲二氫丹參醌

大腸埃希氏桿 △6-去氫彌羅松

芭蕉生粘鞭霉丹參酮

委內(nèi)瑞拉鏈霉 15,16-二氫丹參二 C

香菇 15,16-二氫丹參二 B

Klebsiella pneumoniae Delta 7-avenasterol

栗疫 Delta 5-avenasterol

光滑青霉靈芝烯C

玖紅穗狀霉靈芝T-Q

扣囊復(fù)膜孢酵母靈芝烯A

頂青霉靈芝TR

嗜線蟲致病桿 13-羥基羽扇豆鹼

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