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貨號 | FS-01S63414 |
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產品名稱:CSL半胱氨酰亞砜裂解酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63414
商品介紹:
測定意義 半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥),十字花科蕓薹屬 (如卷心菜,菜花,西蘭花),以及豆科中的合金歡屬中,并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉肽酶和半胱氨亞砜裂解酶的作用下轉化成香菇精,以及產生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是內源性甲醛生成的關鍵酶之一,測定CSL活性對于研究食品安全具有重要意義。 測定原理 CSL催化S-甲基-L-半胱氨亞砜反應產生丙酮酸,與2,4-二硝基肼反應,在堿性條件下顯棕紅色,在510nm下有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、研缽、離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
兔腦鈉/腦鈉肽(BNP)聯(lián)免疫試劑盒大腸埃希氏Rb (4H1) Mouse mAb
兔Pdgfa相關蛋白(PDAP1)聯(lián)免疫試劑盒慢生根瘤Rb (4H1) Mouse mAb
兔腎(REN)聯(lián)免疫試劑盒蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種MARK3 Antibody
兔谷胱S轉移pi基因(GSTpi)聯(lián)免疫試劑盒 pGLuc-BasicTyk2 Antibody
兔粘附蛋白1(CYTH1)聯(lián)免疫試劑盒 節(jié)桿屬Stat Antibody Sampler Kit II
兔多藥耐藥相關蛋白1(MRP1)聯(lián)免疫試劑盒白腐盾殼霉Rb (D20) Rabbit mAb
兔聚集蛋白聚糖(AGC)聯(lián)免疫試劑盒 香茅假單胞Rb (D20) Rabbit mAb
兔細絲蛋白A(FLNα)聯(lián)免疫試劑盒少根根霉Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb
兔肝臟/紅酮激(PK)聯(lián)免疫試劑盒擬隱孢殼GSK-3β (27C10) Rabbit mAb
兔白血病抑制因子(LIF)聯(lián)免疫試劑盒E.coli BL21(DE3)codon plusGSK-3β (27C10) Rabbit mAb
兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)聯(lián)免疫試劑盒豇豆慢生根瘤Phospho-GSK-3α (Ser21) (36E9) Rabbit mAb
兔叢生蛋白(CLU)聯(lián)免疫試劑盒羅倫隱球酵母羅倫變種Phospho-GSK-3α (Ser21) (36E9) Rabbit mAb
兔粒趨化蛋白2(GCP-2)聯(lián)免疫試劑盒山茶Phospho-GSK-3α (Ser21) (36E9) Rabbit mAb
兔中間α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)聯(lián)免疫試劑盒溜曲霉Src Family Antibody Sampler Kit
兔C-肽(C-P)聯(lián)免疫試劑盒果生鏈核盤ESET (D4M8R) XP® Rabbit mAb
CSL半胱氨酰亞砜裂解酶檢測試劑盒微量法亞磷酯 98%連翹 分析標準品,>96.00% (HPLCInsulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰島受體-β(抗原)
亞磷酯 CP,95.0% 藤黃 97% (HPLC)IRS-1 胰島受體底物-1(抗原)
2-基-4-甲基嘧 98%連翹脂 分析標準品,>98%AQP3(aquaporin 3) 水通道蛋白-3抗原
2,4-二氯嘧 98%原人參二 分析標準品,≥98%IRS-2 胰島受體底物-2(抗原)
2,4-二氯-5-甲基嘧 98%番瀉葉苷A 分析標準品,≥96%AQP1(Aquaporin1) 水通道蛋白-1抗原
2-羥基嘧鹽鹽 98%番瀉苷B 分析標準品,≥97%(HPLC)IRS-3 胰島受體底物-3(抗原)
2,4,6- 95%菝葜皂苷元 分析標準品,≥98%IRS-4 胰島受體底物-4(抗原)
阿拉伯樹膠 醫(yī)藥級知母皂苷A-Ⅲ 分析標準品,≥97%AQP5(aquaporin Protein-5) 水通道蛋白-5抗原
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