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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光探針法>> 48T 0.1PCR管PMI基因核酸檢測(cè)試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
PMI基因核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10728 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
根瘤菌固氮模式菌株: no降香黃檀3年生苗(海南檀)根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 63生長(zhǎng)條件: 28-30
新城疫病實(shí)驗(yàn)研究其生物學(xué)活性,并進(jìn)一步從基因水平上進(jìn)行分析。同時(shí),篩選合適的疫苗株制備新型疫苗。模式菌株: no病雞提供形式: 凍結(jié)物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37
金色微球菌生長(zhǎng)條件: 30℃培養(yǎng)基: 2提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1506℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
枯草芽孢桿菌枯草亞種培養(yǎng)基: 0002高分子材料腐蝕;抗藥性較強(qiáng)(防腐試驗(yàn)菌)提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 37℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
發(fā)酵乳桿菌培養(yǎng)基: CM0006模式菌株: no牛奶提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
絲狀支原體絲狀亞種補(bǔ)體結(jié)核抗原模式菌株: no牛傳染性胸膜肺炎奶牛提供形式: 凍干物安全等級(jí): 4培養(yǎng)基: 57生長(zhǎng)條件: 37
荷葉離褶傘培養(yǎng)基: 0014固體栽培提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25℃
龐蒂亞克亞硫鹽桿菌南大西洋細(xì)菌模式菌株: no生物樣/柳珊瑚提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 28℃
塞氏檸檬桿菌共生微生物/鰻魚腸道共生菌模式菌株: no生物樣/鰻魚腸體內(nèi)容物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 28℃
-1507℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基: 0033模式菌株: no土壤樣品提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 20-30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
紫椴栓孔菌(密褶孔菌)培養(yǎng)基: 0017木腐菌提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法
花津?yàn)┭挎邨U菌培養(yǎng)基: 0223模式菌株: no泥樣提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
白側(cè)耳培養(yǎng)基: 14模式菌株: no基物提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25 定期移植法
F105b,60065Kauffmann血清型 39 18模式菌株: no種屬: Proteus│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃
D---奎寧CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor) 降鈣素受體樣蛋白抗原VCP 含纈酪肽蛋白抗體
梓cRaf/Raf1(c-raf 1) cRaf/Raf1抗原VCAM-1/CD106/L1CAM 血管內(nèi)皮粘附分子抗體
根皮苷MEK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1) MEK1/MAPKK1抗體(N-端)VCAM-1 血管內(nèi)皮粘附分子抗體
蛻皮激素CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子VAV3 鳥嘌呤核苷交換因子VAV3抗體
6-姜酚;姜辣素;6-姜辣素CSIG(cellular senescence inhibited gene) 衰老抑制基因抗原VAV2 癌基因VAV2抗體
蒿本內(nèi)酯Cripto-1(N-Terminus) 畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗原(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)N端VAV1 鳥苷轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體
脫氧野尻霉素DNJCripto-1(C-Terminus) 畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗原(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)C端VAT1L/KIAA1576 突觸小泡膜蛋白同源樣蛋白1抗體
土木香內(nèi)酯Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii) 環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原VAT 囊泡乙酰膽堿通道抗體
檸檬苦素Calcitonin 降鈣素抗原VASP 血管擴(kuò)張刺激磷蛋白抗體
諾米林CTBP1(C-terminal binding protein 1) C端結(jié)合蛋白1抗原VASH1 血管抑制蛋白1抗體
PMI基因核酸檢測(cè)試劑盒Telithromycin 紅霉(特利霉素) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
Telmisartan 替米沙坦 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
Telmisartan 替米沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Tiotropiumbromidehydrate 噻托銨一水合物 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,人,醋鹽
AmiodaroneHCl 鹽胺 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,生化試劑級(jí)
AmiodaroneHCl 鹽胺(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,無水物
Amotriptanmalate 阿莫曲普坦蘋果鹽 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BS
Vidarabine/Ara-A 阿糖腺苷 質(zhì)量規(guī)格:>97%,CDKs/JAK2/FLT3抑制劑
Vidarabine/Ara-A 阿糖腺苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,EP
AmpicillinTrihydrate 氨芐西林/氨芐青霉素 質(zhì)量規(guī)格:>97%,integrin抑制劑
AmpicillinTrihydrate 氨芐西林/氨芐青霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,integrin抑制劑
AtipamezoleHCl 阿替美唑鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格:>97%,PI3Kβ選擇性抑制劑
AtipamezoleHCl 阿替美唑鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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