SP淀粉磷酸化酶檢測試劑盒紫外分光光度法-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63576

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產(chǎn)品名稱：SP淀粉磷酸化酶檢測試劑盒紫外分光光度法
規(guī)格：50管/48樣

檢測方法：紫外分光光度法

貨號：FS-01S63576
商品介紹：

測定意義

淀粉磷酸化酶（Starch Phosphorylase，SP）是淀粉代謝過程的可逆反應(yīng)酶，既可催化淀粉的合成，也可催化淀粉的分解。

在高等植物中，淀粉磷酸化酶（合成方向）主要存在于質(zhì)體中，負責(zé)延長淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端；淀粉磷酸化酶（分解方向）主要存在于細胞質(zhì)基質(zhì)中，催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸，負責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解，是淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶。

在植物體中，淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個數(shù)量級，一般認為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解，因此，分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測定意義。

測定原理：

淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無機磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸，葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸，并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產(chǎn)生NADPH，使340nm下吸光值增加。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提?。?/span>

1、細胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細胞：先收集細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
雞解旋樣轉(zhuǎn)錄因子(HLTF)試劑盒Anti-TNFRSF9 AntibodyPE-Cy3標記的兔抗羊IgG

雞血管緊張肽A(ATA)試劑盒 Anti-TNFSF11 AntibodyAlexa Fluor 350標記的兔抗羊IgG

雞葡萄糖磷變位(PGM)試劑盒 Anti-TNFSF12 AntibodyAlexa Fluor 488標記的兔抗羊IgG

雞延伸蛋白A(EloA)試劑盒 Anti-TNFSF13 AntibodyAlexa Fluor 555標記的兔抗羊IgG

雞血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)試劑盒 Anti-TNFSF13B AntibodyAlexa Fluor 647標記的兔抗羊IgG

雞前列腺內(nèi)過氧化物合2(PTGS2/COX-2)試劑盒Anti-TNFSF13B AntibodyPE-Cy5.5標記的兔抗羊IgG

雞趨化樣因子超家族成員5(CKLFSF5)試劑盒Anti-TNFSF15 AntibodyPE-Cy7標記的兔抗羊IgG

雞白分化抗原CD109(CD109)試劑盒 Anti-TNFSF13B AntibodyCy3標記的兔抗羊IgG

雞軟骨糖蛋白39(GP39)試劑盒 Anti-TNFSF13B AntibodyCy5標記的兔抗羊IgG

雞血小板反應(yīng)蛋白2(TSP-2)試劑盒 Anti-TNFSF14 AntibodyCy5.5標記的兔抗羊IgG

雞天青1(AZU1)試劑盒 Anti-TNFSF18 AntibodyCy7標記的兔抗羊IgG

雞白介3介導(dǎo)核因子(NFIL3)試劑盒Anti-TNFSF4 Antibody生物標記的兔抗羊IgG

雞胃蛋白原C(PGC)試劑盒Anti-TNFSF8 Antibody羅丹明標記的兔抗羊IgG

雞性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)試劑盒Anti-TNFSF8 Antibody性磷（AP）標記的兔抗羊IgG

雞谷胱S-轉(zhuǎn)移θ1(GSTθ1/GSTt1)試劑盒Anti-TNFα AntibodyFITC標記的兔抗羊IgG
SP淀粉磷酸化酶檢測試劑盒紫外分光光度法葉分析標準品，≥98%氧化鈹 99.95% metals basisHuman plaet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 人血小板衍生生長因子

葉用于和昆蟲培養(yǎng)，≥97%S-芐基異硫脲鹽鹽 98.5%Human plaet activating factor,PAF ELISA Kit 人血小板活化因子

葉用于植物培養(yǎng),≥97%四氮唑藍 98%Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit 人組織型纖溶原激活劑

2,4'-二溴乙酮 98%2,2'-聯(lián)吡-4,4'-二甲 96%Human Tissue factor,IF ELISA Kit 人組織因子

2-基噻唑 97%鷹嘴豆芽A 分析標準品Human Beta-Thromboglobulin, Beta-TG ELISA Kit 人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白

甲酰 CP硫化鋇 99.7%,200目粉末Human Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 人血小板因子4

3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮 97%溴代丁二 96%Human lymphocyte function associated antigen 2,LFA-2 ELISA Kit 人功能相關(guān)抗原2

氧化鋁 SP,99.999%3-溴戊烷 97%Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 人白三烯E4