13524666654
當(dāng)前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> PLK4抑制劑(Centrinone-B)
| 貨號 | FS-X10843 |
|---|
產(chǎn)品介紹:
Centrinone-B是一種高親和的選擇性PLK4抑制劑(Ki=0.59nM)。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1798871-31-4 純度：98.58% 分子量：631.67 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
英文名稱：Centrinone-B
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
貨號：FS-X10843
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
谷棒桿菌人轉(zhuǎn)移因子Anti-Phospho PRAG1 (Tyr413) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)
熱灰鏈霉菌大鼠肌鈣蛋白ⅠAnti-Phospho PRKD1 (Ser738+Ser742) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)
果生鏈核盤菌小鼠銅藍蛋白Anti-Phospho PPP1R1B (Thr34) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)
釀酒酵母大鼠血清淀粉樣蛋白AAnti-Phospho PRKN (Ser1) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)
五原假黃單胞菌人結(jié)腸癌抗原Anti-Phospho PTK6 (Tyr447) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)
運動替斯崔納菌小鼠p53Anti-Phospho PRKCQ (Ser676) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)
黃藍狀菌小鼠環(huán)磷鳥Anti-Phospho PRKN (Ser378) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
多食鞘桿菌大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Anti-Phospho PRKD2 (Ser876) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
釀酒酵母人H-rasAnti-Phospho PTPN3 (PTPH1)(Ser459) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)
鞘單胞菌屬大鼠α1性糖蛋白Anti-Phospho RAD17 (Ser646) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)
白長鏈霉菌人c-sisAnti-Phospho RAF1 (Ser301) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白(MMP-)
光柄滑銹傘小鼠一氧化氮合成Anti-Phospho RAF1 (Ser642) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白(MMP-)
植物乳桿菌小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成Anti-Phospho RAPGEF1 (Tyr504) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)
Paraburkholderia sp.大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3Anti-Phospho RB1 (Ser780) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)
葡萄座腔菌人c-junAnti-Phospho RHO (Ser334) Antibody人FMS樣酪激3(Flt3)
凝結(jié)芽胞桿菌人c-fosAnti-Phospho RPA2 (S33) Antibody人FMS樣酪激3(Flt3)
20號染色體開放閱讀框11抗體殼蕉孢屬人腎癌Wilms細胞
跨膜蛋白TMED4抗體粉紫香蘑人永生化表皮細胞
末端脫氧核轉(zhuǎn)移抗體綠菇人套細胞淋巴瘤細胞
肺癌抑癌蛋白1抗體橘紅多孔菌人皮膚基底細胞癌細胞
PLK4抑制劑(Centrinone-B)庫氏野野村氏 甲基烯酰氧基三(基硅氧烷基)硅烷白介17A
白迷孔 3%MR-VP培養(yǎng)基白介17F
光滑青霉 氧化試劑白介18
孟氏假單胞 3%NaClONPG白介1β
蘇云金芽孢桿加拿大亞種 2，5-二白介2
鴨疫里氏桿 改良山梨麥康凱(CT-SMAC)瓊脂白介21
冷海水黃桿 改良山梨麥康凱瓊脂添加劑白介22
金龜子綠僵 改良EC肉湯(mEC+n)白介23
球形賴芽孢桿 辛基溴化鎂溶液白介4
海洋海源 新生霉白介6
魯氏酵母 三溴砜白介8
克羅諾桿屬 2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]乙半胱蛋白抑制劑;胱抑C
斯氏假單胞 氧化試紙胞漿型磷脂A2
普利茅斯沙雷氏 實驗生化管表皮生長因子
污黃小菇 沙門氏A-F群診斷血清二
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé)，儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
儀表網(wǎng)