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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 48T 0.1PCR管銅綠假單胞菌核酸檢測(cè)試劑盒
對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測(cè)試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
銅綠假單胞菌核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光探針?lè)?/span> | FS-P10767 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
球孢白僵菌生長(zhǎng)條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 33抗重金屬特性研究提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: CM0048L-蘇氨提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 37℃ 真空冷凍干燥法;定期移植法
結(jié)核分枝桿菌生長(zhǎng)條件: 37℃研究提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no 真空冷凍干燥法
博斯氏菌屬培養(yǎng)基: 848模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 18℃ 真空冷凍干燥法
致病性大腸埃希菌生長(zhǎng)條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法
-1591℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
44838研究模式菌株: no種屬: Mycobacterium│Mycobacterium yunnanensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3生長(zhǎng)條件: 28 真空冷凍干燥法
米蘭鏈霉菌培養(yǎng)基: 0305模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
空泡極單胞菌培養(yǎng)基: 832模式菌株: no凍土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25℃ 真空冷凍干燥法
叢赤殼菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no水中腐木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25-28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法;其他
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 33用于轉(zhuǎn)化大DNA片段提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
糙皮側(cè)耳培養(yǎng)基: CM0017用于食用菌。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法
-1592℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
AJ2173=IAM1603模式菌株模式菌株: yes種屬: Pseudomonas│azotoformans提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃
食烷菌有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 25℃
巴芬(標(biāo)準(zhǔn)品)NRF-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗原TIGAR TIGAR蛋白抗體
巴洛沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)NSE (neuron specific enolase) 神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗原TIF1 gamma/Trim33 轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1γ抗體
巴洛沙星NTCP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide) 鈉離子/?;悄懝厕D(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原TIF1 beta/KAP1/TRIM28 轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體
倍米松Ghrelin 28 腦腸肽28TIF1 Alpha/TRIM24 轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體
倍米松(標(biāo)準(zhǔn)品)OCLN(Occluding) 咬合蛋白抗原TIEG1/KLF10 TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗體
佐卡因,對(duì)氨基甲乙酯Oct-4(Octamer-4) 胚胎干關(guān)鍵蛋白抗原TIE2/CD202b 血管生成素受體2抗體
佐卡因,對(duì)氨基甲乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)ODC(Ornithine decarboxylase) 鳥氨脫羧酶抗原TIE1 血管生成素受體1抗體
鹽達(dá)莫司汀ompF(putative outer membrane porin F protein) 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原TID1/HCA57 肝癌相關(guān)抗原57抗體
鹽達(dá)莫司?。?biāo)準(zhǔn)品)OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原TIAM1 T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)蛋白1抗體
倍他米松ORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原TIAF1 TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1抗體
銅綠假單胞菌核酸檢測(cè)試劑盒Cephalexin 頭孢氨芐(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Gibberellicacid(GA3) 赤霉素GA3 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Chloramphenicol 霉素 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Chloramphenicol 霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Chloramphenicol 霉素(植物細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Sodiumferulic 阿魏鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Sodiumferulic 阿魏鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Cefditorenpivoxil 頭孢妥侖匹酯 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Cefditorenpivoxil 頭孢妥侖匹酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Pyrazinamide 吡嗪酰胺 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Pyrazinamide 吡嗪酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Demeclocyclinehydrochloride 鹽地美環(huán)素;去甲基金霉素 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Demeclocyclinehydrochloride 鹽地美環(huán)素;去甲基金霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
N-MethylParoxetine 甲基帕羅西汀 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Cefquinomesulfate 硫頭孢喹諾 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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