PARP抑制劑(Veliparib)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X10498

產(chǎn)品介紹:

英文名稱：Veliparib

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

Veliparib是一種有效的PARP抑制劑，抑制PARP1和PARP2，Ki分別為5.2和2.9nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：912444-00-9

別名：ABT-888

純度：98.0%

分子量：244.29

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

中文名稱：PARP抑制劑(Veliparib)

英文名稱：Veliparib

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號：FS-X10498

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

間型彎孢線粒體二羧載體蛋白抗體Anti-GLO1 Antibody纖維蛋白(FBL)

葡萄座腔菌類固受體激活蛋白1抗體Anti-GLI3 Antibody纖溶抑制因子(TAFI)

葡萄座腔菌S100A14/15抗體Anti-GLRX2 Antibody纖溶原激活物抑制因子2(PAI2)

大豆慢生根瘤菌組蛋白甲基轉(zhuǎn)移SMYD2抗體Anti-GLRX Antibody纖溶原激活物抑制因子1(PAI1)

加里福尼亞鏈霉菌沉默調(diào)節(jié)樣蛋白SirT7抗體Anti-GLRX2 Antibody纖溶/抗纖溶復(fù)合體(PAP)

大腸埃希氏菌沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體Anti-Glycine decarboxylase/GLDC Antibody纖溶(Fbn)

枯草芽孢桿菌磷化沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體Anti-GLRX3 Antibody仙掌(Cactin)

Pseudomonas torakense指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體Anti-GNAQ Antibody夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)

磷化腦質(zhì)膜單轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體Anti-GNB1 Antibody(PB1121)下丘泌受體2(HCRTR2)

枯草芽孢桿菌突觸蛋白6抗體Anti-Glypican 5/GPC5 Antibody下丘泌受體1(HCRTR1)

豌豆根瘤菌腦質(zhì)膜單轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體Anti-Glutaminase/GLS Antibody周期Y(CCNY)

馬德里青霉超氧化物歧化4抗體Anti-GNG11 Antibody周期T2(CCNT2)

大腸埃希氏菌可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2B1抗體Anti-GNG2 Antibody周期T(CCNT)

松口蘑磷化外紡錘體樣蛋白1抗體Anti-GNG4 Antibody周期O(CCNO)

木賊鐮孢小跨膜糖化蛋白抗體Anti-GNS Antibody周期M4(CCNM4)

谷棒桿菌鈉通道蛋白10α抗體Anti-Golm1/GOLPH2 Antibody周期M3(CCNM3)

唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集9抗體膨端青霉人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

心血管調(diào)節(jié)肽Salusin-α抗體粟酒裂殖酵母人臍靜脈平滑肌細(xì)胞

絲/蘇激36融合同源蛋白抗體降短桿菌人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體格氏李斯特氏菌人心肌成纖維細(xì)胞
PARP抑制劑(Veliparib)黑曲霉正鋯宿主蛋白殘留

產(chǎn)克雷伯氏 3,4,5-三氟芐抗雙鏈DNA抗體;天然DNA抗體

尖鐮孢 5-氟啉瘦

彎孢核γ干擾

平臍蠕孢 1,2-二-4-氟-5-白介2

球形阜孢 5-氟-3-甲白介4

谷棒桿 2鹽鹽硫氧化還原蛋白

匍枝根霉原變種（可訂購） (S)-(+)-1,2,3,4-四氫-1-萘尿微量白蛋白

枯草芽孢桿 5-溴基異萘前列腺E2

枯草芽孢桿 6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽鹽皮質(zhì)

棕褐橙鏈霉 3-氨基-L-酪孕酮

銀色鏈霉雙甘肽鹽鹽雌二

韓國游動微 DL-氨酰-DL-正纈睪酮

克里布所島津氏五聚乙二單癸皮質(zhì)

黑曲霉利托君鹽鹽細(xì)小病抗體

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