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貨號	FS-X10416

中文名稱：PKC抑制劑(Go 6983)

英文名稱：Go 6983

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號：FS-X10416

產(chǎn)品介紹:

英文名稱：Go 6983

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

Go6983是一種有效的的PKC抑制劑，能夠作用于PKCα，PKCβ，PKCγ，PKCδ和PKCζ，IC50值分別為7nM，7nM，6nM，10nM和60nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：133053-19-7

別名：G? 6983;Goe 6983

純度：98.0%

分子量：442.51

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

丁梭菌凍干粉（陽性）蛋白酪磷PTPσ抗體Anti-ATOH1 Antibody白介17B(IL17B)

豌豆根瘤菌ETS結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子FEV抗體Anti-ATP11C Antibody白介17A(IL-17A)

嗜熱毀絲霉神經(jīng)叢蛋白A3抗體Anti-ATP1A2 Antibody白介17(IL-17)

沖擊地土地桿菌磷化蛋白酪磷1C抗體Anti-ATM Antibody白介16(IL-16)

提純禽型結(jié)核菌絲/蘇蛋白磷4C抗體Anti-ATP2A1 Antibody白介15(IL-15)

臘狀芽胞桿菌神經(jīng)元PAS結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Anti-ATP2A3 Antibody白介13(IL-13)

假單胞菌蛋白酪磷受體PCPTP1抗體Anti-ATP2A1 Antibody白介12受體亞基β-1(IL12RB1/IL12R/IL12RB)

易變鏈霉菌植烷酰羥化2相互作用蛋白抗體Anti-ATP2A2 Antibody白介12受體(IL-12R)

釀酒酵母旁瘤抗原MA1抗體Anti-ATP4B Antibody白介12(IL-12/P70)

灰橙鏈霉菌大腦蛋白1抗體Anti-ATP2A2 Antibody白介12(IL-12/P40)

pY26TEF-GPD@1核糖核結(jié)合蛋白2抗體Anti-ATP7A Antibody白介12(IL-12)

球孢白僵菌磷化過氧化活化增生受體γ抗體 PPARγAnti-ATP5MC1 Antibody白介11(IL-11)

松針散斑殼早老蛋白1+2抗體Anti-ATRX Antibody白介10(IL-10)

曲霉豬藍(lán)耳病病抗體Anti-ATP7B Antibody白介1(IL-1)

青霉磷酯Cβ2抗體Anti-ATP5PD Antibody(PB0281)白喉抗體(Diphtheria Ab)

紫色鏈霉菌硫氧還蛋白過氧化物Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體Anti-AURKA Antibody白蛋白(ALB)

太平洋硫膨大桿菌Thioclava│pacifica 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大麗花輪枝孢（棉花黃萎病菌）Verticillium│dahliae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測定
PKC抑制劑(Go 6983)釀酒酵母二乙酯降鈣基因相關(guān)肽受體

巨大芽孢桿 A 2,3-丁二硫幾丁質(zhì)3樣蛋白1

嗜松青霉 3-羥基四過氧化物1

腐皮鐮孢 5-溴吡啶-3-轉(zhuǎn)化生長因子激1

韓國海桿狀 5-溴吡啶-3-孕受體

山原申氏 2-溴吡啶-3-2,3-二磷甘油

泡囊短波單胞 5-溴-2,4-二氟苯膽鹽磺基轉(zhuǎn)移

黃色孢鏈霉 4-氟-3-甲苯UDP葡糖基轉(zhuǎn)移1家族多肽A

孟氏假單胞 4-溴-3-氟甲苯UDP葡糖基轉(zhuǎn)移2家族多肽B

Cecembia sp. 2-氟-5-甲苯UDP葡糖基轉(zhuǎn)移1家族多肽A9

大腸埃希氏 3-溴-4-氟甲苯UDP葡糖基轉(zhuǎn)移1家族多肽A

球孢白僵 1,4-雙(基硅烷基)-1,3-丁二炔UDP葡糖基轉(zhuǎn)移2家族多肽B

環(huán)圈鏈霉 (1S,2S)-2-(二苯基膦)環(huán)己UDP葡糖基轉(zhuǎn)移1家族多肽A9

球孢白僵 2,4-二氟芐血氨

斑形葉點霉 2,3-二氟苯血氨

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