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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> PARP1和PARP2抑制劑(BMN-673)
貨號(hào) | FS-X10273 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:BMN-673 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg BMN-673是一種PARP1/2抑制劑,作用于PARP1,IC50為0.57nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):1207456-01-6 別名:Talazoparib;LT-673 純度:99.83% 分子量:380.35 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
英文名稱:BMN-673
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號(hào):FS-X10273
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
頭狀絲孢酵母Iroquois同源蛋白5抗體Human RFK 總蛋白C(TPC)
膠孢鐮孢整合αE抗體Integrin αEHuman REEP5 總膽汁(TBA)
淺紫灰鏈霉菌產(chǎn)色變種間粘附分子-2抗體Human REEP2 自然殺傷(NK)
醬油曲霉整合β3抗體Human REEP6 自然抗性相關(guān)巨噬蛋白2(NRAMP-2)
雜色曲霉整合α4抗體Human RELT 自然抗性相關(guān)巨噬蛋白1(NRAMP-1)
豬丹絲菌白介15抗體Human RGS4 樁蛋白(Pax)
假單胞菌屬磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體Human REM2 轉(zhuǎn)移因子(TF)
平菇新農(nóng)1號(hào)一氧化氮合成-2抗體(誘導(dǎo)型)Human RFTN1 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)
沙針草狀孢菌干擾α6抗體Human RFX3 轉(zhuǎn)錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)
灰紅鏈霉菌整合β2/Integrin β2抗體Human RFWD3 轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)
茄拉爾氏菌抑制A/Inhibin βA抗體Human RFTN2 轉(zhuǎn)錄因子SOX-5(SOX5)
膠質(zhì)芽孢桿菌*胰島受體底物-3抗體Human RFX5 轉(zhuǎn)錄因子SOX-4(SOX4)
釀酒酵母胰島受體底物p53蛋白抗體Human RFXAP 轉(zhuǎn)錄因子1(AP-1)
紅法夫酵母*胰島受體底物-1抗體Human RGS1(Regulator of G-protein signaling 1) 轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白(TTR)
布萊克威爾假絲酵母胰島受體底物-2抗體Human RGR 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β誘導(dǎo)蛋白IG-H3(TGFBI/BIGH3)
豬丹絲菌胰島受體底物-4抗體Human RGMA 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體3(TGFBR3)
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)原蘇木B
稻梨孢(稻瘟病菌)Pyricularia│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)龍血B
大肥菇Agaricus│bitorquis 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)蔓荊子黃
PARP1和PARP2抑制劑(BMN-673)枯草芽孢桿 2,6-二甲氧基苯甲可溶性淀粉前體蛋白α
死亡谷芽孢桿 BOC-甘-N-羥基琥柏酰亞酯水蛭
異常威克漢姆酵母 3-基苯基成纖維生長(zhǎng)因子受體4
玉蜀黍赤霉(麥類赤霉?。?/span> 6,7-二甲氧基-3,4-二氫異喹啉丁酰酯
裂褶 1-溴-2-萘甲含EGF樣模塊粘蛋白樣受體1
大孢長(zhǎng)根菇 N-叔丁基芐腫瘤病
苛求芽胞桿 3-氨基-4-甲氧基吡啶色P450還原
解葡聚糖微桿 5-(2-呋喃基)異惡唑-3-羧乙酯神經(jīng)肽P
紅褐肉座 N,N-二乙基十二半胱氨酰白三烯
蘋果黑腐皮殼 2-氨基-5-苯基吡啶淚腺富脯蛋白
綠色木霉 2--5-氟甲苯肺炎衣原體IgM抗體
黃絮鱗鵝膏 4-甲基煙甲酯白介17C
茄勞爾氏 3,5-二溴-4-羥基肺炎衣原體IgG抗體
無(wú)花果曲霉變種 (R)-(+)-α-異酯硫磺S
土生類諾卡氏 2,3-二苯基膜外核焦磷;磷二酯家族成員2
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