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貨號 | FS-X10271 |
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中文名稱:Bcl-2抑制劑(Navitoclax)
英文名稱:Navitoclax
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10271
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Navitoclax 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg Navitoclax是一種有效的Bcl-2抑制劑,對抗凋亡Bcl-2蛋白家族(包括Bcl-xL,Bcl-2和Bcl-w)具有高親和力,Ki值小于1nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:923564-51-6 別名:ABT-263 純度:99.34% 分子量:974.61 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
芽孢桿菌屬免疫球蛋白超家族成員10抗體Human RIMKLB Beta Agonists(β-)免疫試劑盒
芽胞桿菌大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體Human LRP11(Low-density lipoprotein receptor-related protein 11) 19-Nortestosterone(19-去甲睪)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌鲇澤亞種干擾α受體抗體Human RIMS4 左右不對稱發(fā)育因子2(LEFTY2)
焦曲霉磷化干擾α受體抗體Human RIN3 組織因子途徑抑制物-2(TFPI-2)
玫瑰皮黃鏈霉菌磷化胰島受體β抗體Human RINT1 組織因子途徑抑制物(TFPI)
樟疫霉核因子κB抑制蛋白E抗體Human RING1 組織因子(TF)
貝萊斯芽胞桿菌磷化整合β4抗體Human ribosomal protein L4 組織型纖溶原激活劑(t-PA)
大腸埃希氏菌磷化整合β4抗體Human RIC8A 組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)
嗜腳動物咸海鮮球菌IQCD蛋白抗體Human DDT(D-Dopachrome Tautomerase) 組織相容性2-K1-K區(qū)(H2-K1)
硝鹽還原嗜鹽堿桿菌IQCC蛋白抗體Human RGS5 組織多肽特異性抗原(TPS)
棲土曲霉IQCA1蛋白抗體Human RGS7(Regulator of G-protein signaling 7) 組織多肽抗原(TPA)
矩圓黑盤孢集成復(fù)雜蛋白亞單位3抗體Human RGS9 組織蛋白去乙?;?HD)
孤島海桿狀菌干擾alpha 14蛋白抗體Human RGSL1 組織蛋白抗體(Cath Ab)
嗜松籃狀菌白介6抗體Human RHBDD1 組織蛋白S(CTSS)
環(huán)狀芽胞桿菌白介-10抗體Human RHBDL2 組織蛋白L1(CTSL1/CTSL)
植物乳桿菌植物亞種白介6抗體Human RHCG 組織蛋白K(cath-K)
AS2.590資源名稱: 平滑假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)蘆薈
赭鮭色正青霉Eupenicillium│ochrosalmoneum 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)苦玄參IB
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)苦玄參IA
Bcl-2抑制劑(Navitoclax)毛柄(金針菇) 2--4-氨基-6-三氟組蛋白脫乙酰基9
酒酒球 4-甲硫基苯甲p300乙酰轉(zhuǎn)移
毛霉屬 L-乳正丁酯和肽
釀酒酵母 N--2-吡咯烷酮顆粒A
中慢生華癸根瘤 2,6-二溴-4-氟苯化高鐵血紅蛋白
四脊曲霉 2-氟二二甲酯活化A受體抗體
枯草芽孢桿 5,6,7,8-四氫喹喔啉生長釋放抑制
肉色栓 5--2-甲氧基促黑色釋放因子
西洼湖戈登氏 4-溴-3,5-二吡啶黑色
芽孢桿 6'-二乙氨基-2'-二芐氨基熒烷色P450
Escherichia (S)-3-羥基-2-吡咯烷酮磷肌3激
青霉屬 6-氟-4-羥基喹啉-3-羧α-淀粉
穿孔假單胞 2,6-二甲基-3-溴吡啶分泌磷蛋白1
黑曲霉 2,3,5-三溴-4-I因子補體片段3b
枯草芽孢桿 3-氨基-2-α-乳白蛋白;α乳清蛋白
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