CDK抑制劑-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-X10835

中文名稱：CDK抑制劑

英文名稱：AT7519 Hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào)：FS-X10835

產(chǎn)品介紹:

AT7519 Hydrochloride是一種有效的CDK抑制劑，對(duì)CDK1，CDK2，CDK4-CDK6以及CDK9的IC50值分別為210，47，100，13，170和<10nM。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號(hào)：902135-91-5

純度：98.90%

分子量：418.71

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

川黃桿菌小鼠ⅩAnti-PHF1 Antibody人黏著斑激(FAK)

畢赤酵母屬人角蛋白17Anti-PHF3 Antibody人黏著斑激(FAK)

傳染性支氣管炎病大鼠糖皮質(zhì)類固受體Anti-PGLS Antibody人可溶性磷脂A2(sPL-A2)

解橡膠諾卡氏菌大鼠黃體生成釋放激Anti-PHAX Antibody人可溶性磷脂A2(sPL-A2)

糙皮側(cè)耳人制瘤M受體Anti-PHF3 Antibody人脫氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)

乳酒假絲酵母小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子Anti-PHKB Antibody人脫氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)

鞘脂菌小鼠前心鈉肽Anti-PHKA1 Antibody人精(Arg)

黃曲霉大鼠8異前列腺Anti-PHKG1 Antibody人精(Arg)

嗜湖短芽胞桿菌人B淋巴瘤因子3Anti-PHLDA1 Antibody人精(Arg)

香栓孔菌人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3Anti-PHLPP1 Antibody人精(Arg)

Megamonas funiformis小鼠N端前腦鈉Anti-Phospho AATF (Ser477) Antibody堿性磷(NAP)

多粘類芽孢桿菌大鼠γ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16Anti-Phospho ABL1 (Tyr393/439) Antibody堿性磷(NAP)

中國(guó)臺(tái)灣根霉人P27蛋白Anti-Phospho ACO1 (Ser711) Antibody人間變性淋巴瘤激(ALK)

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌小鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物Anti-Phospho AKT1 (Thr342) Antibody人間變性淋巴瘤激(ALK)

嗜碳芽孢桿菌大鼠基質(zhì)衍生因子1aAnti-Phospho ALOX5 (Ser523) Antibody人激動(dòng)異構(gòu)/分裂MB(CKMB)

蝙蝠蛾擬青霉大鼠血漿α顆粒膜蛋白Anti-Phospho ANAPC1 (S355) Antibody人激動(dòng)異構(gòu)/分裂MB(CKMB)

環(huán)指蛋白94抗體蓋囊菇小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞

G蛋白偶聯(lián)誘導(dǎo)蛋白2受體抗體粘孢白僵菌大鼠回腸細(xì)胞

腺泡狀軟組織肉瘤結(jié)構(gòu)域蛋白ASPC抗體黃毛黎豆根瘤菌人子宮頸內(nèi)膜上皮細(xì)胞

轉(zhuǎn)錄共激活因子TAZ抗體藤黃檀根瘤菌人慢性髓樣白血病細(xì)胞
CDK抑制劑傷口諾卡氏百清腎上腺

蘭鏈霉百清乙型肝炎病核心抗原

粘滑菇屬四對(duì)苯二甲肌

松口蘑 N,N-二甲基乙酰二甲基縮細(xì)小病抗體

黑曲霉鄰氨基苯肌激同工MB

根霉 L-2,4-二氨基丁酮激M2

香港洛克氏 4-甲氧基茴香硫糖原磷化同工BB

吉氏根瘤 2,4-二甲基-6-叔丁基皮質(zhì)類固11β脫氫同工1

大腸埃希氏 4-苯氧基乙空腸彎曲

伍氏束縛 3-二磷腺

根瘤屬 3-溴戊烷脂聯(lián)

烏斯懷亞海單胞 2,6-二氟苯甲酰性脂肪

雞早熟艾美爾球蟲(LZ株) (+)-2,2'-[(3aR,8aS)-3a,8a-二氫-8H-茚苯[1,2-d]并惡唑中性脂肪

絳紅鏈霉 1,2-二(二甲硅基)苯白介1β

拜耳接合酵母 N-乙酰-D-纈鈣調(diào)蛋白

国产精品成人网站,日韩视频二区,亚洲成人手机电影,怡红院国产

CDK抑制劑返回列表頁

儀表網(wǎng)

會(huì)員登錄

收藏該商鋪

提示