實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

PCR技術(shù)的定量原理：
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測(cè)試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
 N.326fB　1b　I　4,6...模式菌株: no種屬: Shigella│flexneri提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃

海源菌海洋可培養(yǎng)細(xì)菌多樣性模式菌株: no水樣/上層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 511生長(zhǎng)條件: 25℃

 -587℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

稻生黃單胞菌（無(wú)法提供）培養(yǎng)基: 33模式菌株: no水稻病葉提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28 定期移植法

皮氏無(wú)色桿菌培養(yǎng)基: 33模式菌株: no蘑菇提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 37℃ -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 2豬腸道致病菌提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 37℃ 真空冷凍干燥法

 AS4.252生長(zhǎng)條件: 28℃培養(yǎng)基: 12種屬: Streptomycesalboflavus(WaksmanetCurtis)WaksmanetHenrici安全等級(jí): 1模式菌株: no

 AS4.166生長(zhǎng)條件: 28℃培養(yǎng)基: 12種屬: StreptomyceslongisporoflavusKrass安全等級(jí): 1模式菌株: no

金頂側(cè)耳生長(zhǎng)條件: 25培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no 定期移植法

 -588℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

小單孢菌屬抗細(xì)菌；抗金黃色葡萄球菌；抗枯草芽孢桿菌模式菌株: no樹林土提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0012生長(zhǎng)條件: 35-37C

鏈霉菌屬菌種抗恥垢分支桿菌模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C

病實(shí)驗(yàn)研究其生物學(xué)活性，并進(jìn)一步從基因水平上進(jìn)行分析。模式菌株: no病雞呼吸道和大部分的消化道提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37

釀酒酵母麥角固醇合成研究模式菌株: no甘蔗提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 13生長(zhǎng)條件: 28℃

杏鮑菇食用菌模式菌株: no朽木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 17生長(zhǎng)條件: 20℃

硝孢鏈霉菌培養(yǎng)基: 0012模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

六亞價(jià)級(jí)按HexametxylenetetramineAR500g

SM1192GeneRuler Low Range DNA Ladder74

R3875-5GL-Rhamnose L-鼠李糖1109-28-0.5g

蛋白標(biāo)準(zhǔn)(5mg/ml BSA)1ml

Ninthydrin25g

石墨粉GraphiteSP250g

三氧化二硼Boron trioxide4N10g

錄鉑鉀Platinum potewwium chlorideAR1g

二氧化硅SilicaSP100g

氧化magnesiaSP10g

大鼠胰脂肪酶(PL)ELISA試劑盒 ，英文名： PL ELISA Kit

人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-Qfeveraibody,ai-Q-AbELISAKit 96T/48T

大鼠γ氨基丁(GABA)免疫試劑盒 Rat Gamma-aminobyric acid,GABA ELISA Kit

CLIAKitfo4ELISAKit大鼠甲狀腺素規(guī)格：48T/96T

人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pCMV5-RUNX3)感受態(tài)菌DH-5α1毫升

ELISAKitCAM-ab人抗鈣調(diào)素特異抗體規(guī)格：48T/96T
麻風(fēng)桿菌(ML)核酸檢測(cè)試劑盒脫水長(zhǎng)春38390-45-3英文名：3',4'-Anhydrovinblastine  

英文別名：3',4'-Didehydroisoleurosine  

登錄號(hào)：38390-45-3

分子式：C46H56N4O8

分子量：792.96

分子結(jié)構(gòu)：

外觀：白色晶體

規(guī)格：20 mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。

提取來(lái)源：夾竹桃科植物長(zhǎng)春花中提取修飾

溶解性：可溶于性水溶液，不溶于。

藥理藥效：能干擾增殖細(xì)胞紡錘體的形成，使有絲分裂停止于中期。并有免疫抑制作用。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年