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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> PAK抑制劑(KPT-9274)
貨號(hào) | FS-X10803 |
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操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
KPT-9274 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | FS-X10803 |
產(chǎn)品介紹:
KPT-9274是PAK的抑制劑,在MTT試驗(yàn)中測(cè)定的IC50值小于100nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):1643913-93-2 純度:99.28% 分子量:610.63 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
新城疫病人可溶性腫瘤壞死因子α受體Anti-NCBP2 Antibody人葡萄球菌蛋白A(SPA)
橄欖色盾殼霉大鼠促性腺激釋放激受體Anti-NCK2 Antibody人葡萄球菌蛋白A(SPA)
沃氏葡萄球菌大鼠磷化腺活化蛋白激Anti-NCOA4 Antibody人刀豆A(ConA)
泡囊短波單胞菌兔超敏C反應(yīng)蛋白Anti-NCOA3 Antibody人刀豆A(ConA)
構(gòu)巢曲霉植物維生DAnti-NCLN Antibody人游離原卟啉(FEP)
熱帶假絲酵母小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Anti-NCF4 Antibody人游離原卟啉(FEP)
白色念珠菌人可溶性因子受體Anti-NCK2 Antibody人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)
木賊鐮刀菌人可溶性凋亡相關(guān)因子配體Anti-NCoR1 Antibody人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)
板栗蛇孢日規(guī)殼植物維生B6Anti-NCOA5 Antibody人過氧化(GSH-Px)
深紅正青霉兔基質(zhì)金屬蛋白1Anti-NCOA7 Antibody人過氧化(GSH-Px)
球孢白僵菌小鼠骨成型蛋白2Anti-NCR2 Antibody人(GSH)
釀酒酵母大鼠熱休克蛋白47Anti-NDC80 Antibody人(GSH)
釀酒酵母人凋亡抑制因子Anti-NCS1 Antibody人17-類固(17-KS)
葡萄座腔菌小鼠骨成型蛋白4Anti-NDUFA4 Antibody人17-類固(17-KS)
栗色渾圓鏈霉菌植物25羥基維生D3Anti-NDUFA4 Antibody人17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)
離中不粘柄菌兔8-異構(gòu)前列腺Anti-NDUFA3 Antibody人17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)
視黃脫氫13抗體蘇云金芽孢桿菌東北亞種人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)
環(huán)指蛋白160抗體蘇云金芽孢桿菌九州亞種TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞
E3泛蛋白連接144A抗體蘇云金芽孢桿達(dá)姆斯塔特亞種人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞
RGAG4蛋白抗體丁香假單胞菌丁香致病變種人甲狀腺癌細(xì)胞KHM-5M(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
PAK抑制劑(KPT-9274)鱗皮扇菇 多粘B(2.25萬單位)氨基轉(zhuǎn)移
粒落曲霉 布氏桿種子培養(yǎng)基心肌特異性肌鈣蛋白T
赭曲霉 (S)-(+)-1,2-異亞基甘油鞭毛蛋白
白僵 克氏瓊脂流行性腹瀉病抗體
瓷珠種保存管種明細(xì) 甲苯藍(lán)-DNA平板促性腺
巨大芽孢桿 鐵瓊脂鞭毛蛋白抗體
球孢白僵 儲(chǔ)存礦物鹽溶液半胱氨酰白三烯2
小煤炱屬 3-氨基噻吩-2-羧甲酯髓過氧化物3
核果叢梗孢 *瓊脂培養(yǎng)基半胱氨酰白三烯1受體
雙環(huán)林地蘑菇 液體培養(yǎng)基超氧化物歧化
海洋拉布倫茨氏 麥芽汁瓊脂高密度脂蛋白2
雅致放射毛霉 Preston肉湯基礎(chǔ)抗核糖體抗體
松口蘑 2-氟-4-吡啶前列腺E合2
水棲黃桿 YM培養(yǎng)基半胱氨酰白三烯
解污泥黃桿 布氏肉湯添加劑戊型肝炎病抗體
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