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貨號 | FS-X10519 |
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中文名稱:RARα和RARβ激動劑(Tamibarotene)
英文名稱:Tamibarotene
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
貨號:FS-X10519
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Tamibarotene 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg Tamibarotene是RARα/β激動劑,常用于癌癥治療。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:94497-51-5 別名:Am 80 純度:99.77% 分子式:C??H??NO? 分子量:351.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鏈霉菌原癌基因8抗體Anti-IHH Antibody鐵氧還蛋白1(FDX1)
煙色離褶傘腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8抗體Anti-IGLL1 Antibody調(diào)節(jié)激活正常T-表達分泌因子(RANTES)
白被黑蛋巢TBC結(jié)構(gòu)域TBCD4蛋白抗體Anti-IKBKB Antibody天青殺1(AZU1)
芽孢桿菌腫瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體Anti-IKBKB Antibody(PB0219)天冬酰內(nèi)肽(LGMN)
柯氏黑蛋巢腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白4抗體Anti-IKBKG Antibody天冬酰(ASPG)
棒曲霉結(jié)構(gòu)蛋白家族1抗體Anti-IKBKG Antibody天冬酰合成(ASNS)
大腸埃希菌癌雌激誘導(dǎo)蛋白抗體Anti-IKZF1 Antibody天冬酰肽(ASPEP)
尖孢鐮刀菌跨膜蛋白18抗體Anti-IL10 Antibody天冬?;咸烟?AGA)
釀酒酵母磷化雌激反應(yīng)指狀蛋白抗體Anti-IL10 Antibody天冬轉(zhuǎn)2(AST2)
pBBRMCS-2磷化神經(jīng)特異性微管蛋白抗體Anti-IKZF1 Antibody天冬轉(zhuǎn)(AST)
動物雙歧桿菌瞬時受體電位離子通道蛋白7抗體(M亞家族)Anti-IKZF2 Antibody天冬酰3(ACY3)
華美鏈霉菌“冷"蛋白TRPM8抗體Anti-IKKi/IKKe/IKBKE Antibody天冬甲酰轉(zhuǎn)移(ATCase)
芽孢桿菌瞬時受體電位離子通道蛋白3抗體(M亞家族)Anti-IL10 Antibody天冬β羥化(ASPH)
立枯絲核菌(測序正確)雌激反應(yīng)鋅指蛋白抗體Anti-IL10 Antibody特異性蛋白1(Sp1)
絨毛栓菌TWIST蛋白2抗體抗體Anti-IL10 Antibody糖盞蛋白(GC)
香菇磷化雌激反應(yīng)指狀蛋白抗體Anti-IL10 Antibody糖原磷化M(PYGM)
細(xì)胞分化蛋白SEPT8抗體羊毛鏈霉菌小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞質(zhì)和紡錘體機化蛋白A抗體羊肚菌屬小鼠主動脈平滑肌細(xì)胞
絲/精相關(guān)核基質(zhì)蛋白4抗體蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
絲/精相關(guān)核基質(zhì)蛋白3抗體蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)(斜面)小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞
RARα和RARβ激動劑(Tamibarotene)耐輻射奇球 腺-5′-二磷 鈉鹽嗜性粒陽離子蛋白
孤獨浜本酵母 4-苯乙烯單核趨化蛋白4
球形賴芽孢桿 N-Boc-反式-4-氟-L-脯甲酯多形核白彈性蛋白
約氏不動桿 N-Boc-4,4-二氟-L-脯甲酯巨噬炎癥蛋白-1β
果生鏈核盤 3-苯基肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子
Fmoc-L-beta-高谷 6-叔丁酯表面活性蛋白D
玉細(xì)性枯萎病 2H-1,3-苯并噁-2,4(3H)-二酮克拉拉蛋白
葉點霉屬 氘代甲苯-d8β-防御2
乳桿屬 2-氨基-5-溴苯并噻唑核因子κB
間型腐霉 布雷非德 A二肽基肽VI
羊泰勒蟲(張家川株-2) 2,4,5-三溴咪唑巨噬炎性蛋白-1α
大豆慢生根瘤 3,4-二甲氧基脂肪合成
秦氏蜜環(huán) 1-丁基吡啶四氟鹽腺相關(guān)病8
豌豆根瘤 D-精氨酰腺相關(guān)病8抗體
霍利斯格里蒙 4-溴-3,5-二氟苯Ⅲ型前膠原氨基末端肽
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