當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 48T 0.1PCR管貝類甲肝病毒RNA核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
貝類甲肝病毒RNA核酸檢測試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10771 |
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
芽孢桿菌分類;研究;教學(xué)模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 832生長條件: 30℃
蒼白桿菌培養(yǎng)基: 471能夠降解石油,柴油等烷烴類物質(zhì),可用于生物修復(fù)。水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077面包發(fā)酵。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法
青霉屬菌產(chǎn)生真菌素模式菌株: no枯枝枯葉提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C
根瘤菌(非豆科共生)培養(yǎng)基: 0063模式菌株: no水稻根際提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1600℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
DMST3482培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no種屬: Pseudomonas│aeruginosa提供形式: 凍干物安全等級: 2生長條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
乳乳球菌乳亞種培養(yǎng)基: CM0005模式菌株: no提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
透孢黑團(tuán)殼生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法;其他
IFFI6038培養(yǎng)基: 10%脫脂奶粉模式菌株: no種屬: Streptococcus thermophilus提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 50℃,厭氧或微好氧 2-8℃
S488致病菌檢測芯片模式菌株: no種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 51生長條件: 37℃
枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基: CM0050α-淀粉酶。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
-1601℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
北京棒桿菌培養(yǎng)基: CM0050以糖蜜為原料發(fā)酵L-賴氨。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
鏈霉菌屬培養(yǎng)基: CM0038活性物質(zhì),卡斯帕酶7抑制活性提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C -80℃冰箱凍結(jié)
鏈霉菌屬菌種培養(yǎng)基: CM0012模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28C 真空冷凍干燥
西地尼布PEG10(Paternally expressed gene 10) 肝癌高表達(dá)基因抗原TGF beta 3 轉(zhuǎn)移生長因子β3(TGFβ3)抗體
塞來昔布,塞內(nèi)昔布,賽利克西PENK/Enkephalin A(Preproencephalin A) 腦啡肽TGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長因子β2抗體
塞來昔布,塞內(nèi)昔布(標(biāo)準(zhǔn)品)PEPT2 (Peptide-transporters 2) 腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運蛋白2抗原TGF beta 2 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)抗體
丁氮芥PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase) 蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗原TGF beta 1/LAP 轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ)抗體
鹽金霉素,鹽四環(huán)素FSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein) 纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗原TGF Beta 1(CT) 轉(zhuǎn)化生長因子β1抗體
鹽金霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)P-GP(P-glycoprotein) P-糖蛋白抗原TGF Beta 1 轉(zhuǎn)化生長因子β1抗體
西洛他唑Pepsinogen C peptide 胃蛋白酶原C蛋白抗原TGF alpha 轉(zhuǎn)移生長因子α抗體
西洛他唑(標(biāo)準(zhǔn)品)PGC-1 Alpha(peroxisome proliferator-activated receptor- Gamma coactivator 1 Alpha) 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗原TG 兔抗甲狀腺球蛋白
順鉑(進(jìn)分)PGRN (progranulin) 顆粒蛋白前體抗原TFR2/Transferrin Receptor 2 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2抗體
順鉑PHB(Prohibitin) 抑制素/腫瘤抑制因子抗原TFPI-2 組織因子途徑抑制劑-2抗體
貝類甲肝病毒RNA核酸檢測試劑盒Nifuroxazide 硝呋酚酰肼;硝呋奇特 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Nifuroxazide 硝呋酚酰肼;硝呋奇特(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Cepharanthine 千金藤素 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Cepharanthine 千金藤素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CaspofunginAcetate 醋卡泊芬凈 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Parthenolide 小白菊內(nèi)酯 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Parthenolide 小白菊內(nèi)酯 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Rizatriptan 利扎曲坦 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
DarunavirEthanolate 地瑞那韋乙醇鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Vilazodone 維拉佐 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Dabigatran 達(dá)比加群 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Repaglinide 瑞格列奈 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Repaglinide 瑞格列奈(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
D-(-)-Arabinose D-阿拉伯糖 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
D-arabinose D-阿拉伯糖(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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