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貨號 | FS-X10606 |
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中文名稱:FTase抑制劑(Tipifarnib)
英文名稱:farnesyltransferase inhibitor
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10606
產(chǎn)品介紹:
Tipifarnib是一種有效的,特異性的farnesyltransferase(FTase)抑制劑,IC50值為0.6nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:192185-72-1 別名:IND 58359;R115777 純度:98.63% 分子量:489.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
糞鞘桿菌兔抗豚鼠IgMAnti-RIPK2 Antibody肌球蛋白重鏈2(MYH2)
根瘤菌兔抗馬IgGAnti-RMI2 Antibody肌球蛋白重鏈11(MYH11)
短芽孢桿菌屬兔抗人IgMAnti-RNASE4 Antibody肌球蛋白重鏈10(MYH10)
釀酒酵母兔抗猴IgMAnti-RNASE3 Antibody肌球蛋白重鏈1(MYH1)
短芽孢桿菌兔抗小鼠IgMAnti-RNASE1 Antibody肌球蛋白輕鏈激(MYLK)
菌生假絲酵母兔抗小鼠k鏈Anti-RND1 Antibody肌球蛋白輕鏈9(MYL9)
釀酒酵母兔抗長爪沙鼠IgGAnti-RNF169 Antibody肌球蛋白輕鏈2(MYL2)
炭黑曲霉兔抗水貂IgGAnti-RNF168 Antibody肌球蛋白輕鏈1(MYL1)
福氏志賀氏菌驢抗人IgGAnti-RNF31 Antibody肌球蛋白ⅩⅨ(MYO19)
釀酒酵母驢抗兔IgGAnti-RNF186 Antibody肌球蛋白ⅩⅧB(MYO18B)
斑玉蕈驢抗豚鼠IgGAnti-RNF123 Antibody肌球蛋白ⅩⅧA(MYO18A)
維多利亞維希尼克氏酵母鼠抗人IgG單克抗體Anti-RNF43 Antibody肌球蛋白ⅩⅥ(MYO16)
ArthrobacterPE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體Anti-RNF8 Antibody肌球蛋白ⅩⅤ(MYO15)
產(chǎn)氮假單胞菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體Anti-ROBO1 Antibody肌球蛋白Ⅹ(MYO10)
產(chǎn)脲節(jié)桿菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體Anti-RNH1 Antibody肌球蛋白ⅨB(MYO9B)
鐮刀菌屬Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體Anti-ROCK2 Antibody(PB0428)肌球蛋白ⅨA(MYO9A)
核孔蛋白NUP160抗體藤倉赤霉小鼠嗅鞘細(xì)胞提取物
細(xì)胞核分離基因C蛋白抗體舊金山乳桿菌小鼠神經(jīng)元細(xì)胞提取物
痛覺調(diào)節(jié)肽NPFF抗體副干酪乳桿菌副干酪亞種小鼠小腦顆粒細(xì)胞提取物
神經(jīng)4抗體擬態(tài)弧菌小鼠腦膜細(xì)胞提取物
FTase抑制劑(Tipifarnib)鏈球(不定種) 二二茂鋯白介6
多粘類芽孢桿 N-芴甲氧羰基-D-天冬-4-叔丁酯白介1β
橄欖色盾殼霉 雙(環(huán)戊二烯)釕白介10
飛禽島海草球 1,1'-聯(lián)萘-2,2'-雙(三氟磺酯)雌
大腸埃希氏 羥基-γ-環(huán)糊精前列腺特異性抗原
石竹伯克霍爾德氏 (S)-2-Boc-氨基-1,4-丁雌二
Cecembia 1,1':3',1''-三聯(lián)苯-5'-孕酮
Paenochrobactrum glaciei 對曱?;筋l那酯繆勒管抑制物質(zhì);抗繆勒管
禾稈鐮孢霉 6-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-3,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-3-酮鹽鹽白介8
放射型根瘤 (R,R)-2,6-雙(4-苯基-2-惡唑啉-2-基)吡啶活性氧簇
釀酒酵母 Fmoc-O-叔丁基-D-絲天門冬氨基轉(zhuǎn)移;谷草轉(zhuǎn)氨
豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS16 4-溴-2-氟吡啶谷轉(zhuǎn)氨
無花果假單胞 2-溴-3-吡啶甲短鏈脂肪
細(xì)鏈格孢 三氟磺銦堿性成纖維生長因子
類芽孢桿 1-氨基環(huán)基鹽鹽血小板源性生長因子
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