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貨號 | FS-01S63765 |
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產(chǎn)品名稱:SβXYS土壤β木糖苷酶可見分光光度法
規(guī)格:50管/24樣
檢測方法:可見分光光度法
貨號:FS-01S63765
商品介紹:
測定意義 β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類半纖維素降解的關鍵酶,產(chǎn)物木糖可作為碳源應用于微生物發(fā)酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應用于造紙工業(yè),比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保,具有廣泛的應用價值。 測定原理: 4-羥甲基-7-香豆(MUB)在 365 nm波長處激發(fā), 能在 470 nm處檢測到熒光, 它與某些物質(zhì)結(jié)合后熒光特性消失, 通過酶的水解作用MUB釋放出來, 通過檢測熒光量來表征酶活性。 自備儀器和用品: 多功能酶標儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
TPD52/Prostate and colon associated protein 前列腺癌和結(jié)腸癌相關蛋白 * 0.2ml
TPD54/TPD52L2 腫瘤蛋白D54蛋白抗體 * 0.2ml
TRIM47 星形細胞瘤高表達蛋白抗體(環(huán)指蛋白100) * 0.2ml
TSP50 腫瘤/抗原20抗體 * 0.2ml
TULP2/CT65/Cancer testis antigen 65 腫瘤/抗原65 * 0.2ml
TERT/EST2/Telomerase reverse transcriptase 端粒相關蛋白2抗體(端粒逆轉(zhuǎn)錄) * 0.2ml
UBAP1 泛相關蛋白1抗體(鼻咽癌相關基因20蛋白) * 0.2ml
UXT/Ubiquitously expressed transcript 廣泛表達轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體 * 0.2ml
WDR16 WD重復蛋白16抗體 * 0.2ml
WDR19 WD重復膜蛋白19抗體 * 0.2ml
WSB2/WD SOCS box protein 2 信號傳導抑制蛋白WD重復蛋白2抗體 * 0.2ml
WWP1 WW結(jié)構(gòu)域E3泛連接1抗體 * 0.2ml
YY1AP1/HCCA2 肝癌相關蛋白2抗體(轉(zhuǎn)錄因子YY1結(jié)合蛋白1抗體) * 0.2ml
ZNF146 鋅指蛋白146抗體 * 0.2ml
ZNF23 鋅指蛋白23抗體 * 0.2ml
SβXYS土壤β木糖苷酶可見分光光度法硬脂甲酯 CP,45%(GC)十溴二 98%Kim-1(Human Kidney injury molecule 1) ELISA Kit 人腎損傷分子1
硬脂甲酯 分析標準品,>99.5% (GC)三乙基硅烷 99%AQP-5(Human Aquaporin 5) ELISA Kit 人水通道蛋白5
色標Standard for GC,≥99.5% (GC)4-溴甲酰氯 96%AQP-4(Human Aquaporin 4) ELISA Kit 人水通道蛋白4
硬脂甲酯 95%4-(氯甲基)甲酰氯 98%AQP-3(Human Aquaporin 3) ELISA Kit 人水通道蛋白3
油甲酯 CP,≥60.0% (GC)間氯甲酰氯 97%AQP-2(Human Aquaporin 2) ELISA Kit 人水通道蛋白2
4-雄烯-4--3,17-二酮 99%4-氯丁酰氯 98%AQP-1(Human Aquaporin 1) ELISA Kit 人水通道蛋白1
(R)-(+)-苧烯 97%2,4-二氯甲酰氯 98%AQP-0(Human Aquaporin 0) ELISA Kit 人水通道蛋白0
四烷絡合物 1M solution in THF3,5-二甲酰氯 97%RF(Human rheumatoid factor) ELISA Kit 人類風濕因子
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