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腦膜炎球菌屬C型核酸(NM-C)檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-05-10 13:38:48瀏覽次數(shù):92次

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腦膜炎球菌屬C型核酸(NM-C)檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腦膜炎球菌屬C型核酸(NM-C)檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P10465
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性*定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
海洋海棒狀菌1.海洋石油污染生物修復; 2.生物活性物質(zhì)篩選模式菌株: no水樣/上層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃

馬腺疫鏈球菌獸疫亞種研究模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 396生長條件: 37

 JCM15447=DSM21340模式菌株模式菌株: yes種屬: Marivitacryptomonadis海洋浮游生物安全等級: 1培養(yǎng)基: 102生長條件: 30℃

蘇云金芽孢桿菌培養(yǎng)基: 266模式菌株: noGrain提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法

 -665℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

墻壁圣格奧爾根菌潛在的無機污染物抗性菌/分離自錳抗性菌群模式菌株: no硫化物/灰綠色硫化物提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃

根霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

空泡極單胞菌培養(yǎng)基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 18℃ 真空冷凍干燥法

斯塔普氏菌培養(yǎng)基: 471潛在的有機污染物降解菌/分離自草甘膦富集菌群沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

肉桂(地)鏈霉菌培養(yǎng)基: CM0039產(chǎn)生Monensin莫能霉素提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥

巴西果小克銀漢霉生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

 -666℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

溶藻弧菌 -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法生長條件: 22℃提供形式: 凍干物;凍結(jié)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 820

懷槐多年臥孔菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法

ATCC27126模式菌株: yes安全等級: 1種屬: Alteromonas│macleodii海水提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0442生長條件: 26℃

LentiCRISPR V2

4-(辛基基)  3-  異丁基溴化 (17% 四)

2--3-甲基-5-溴  3,4,5,6-四氫鄰  4-(N,N-二甲基)溴化

2-芐溴  2-  己內(nèi)酰胺溴化

4-溴-5--2-胺  N-溴甲基鄰  4-氧基基溴化

ISOPROPYL BROMIDE  異丙基溴化  920-39-8

Ethyl chloride  乙基化  2386-64-3

Butyl chloride  正丁基化  693-04-9

ETHYL BROMIDE  乙基溴化  925-90-6

大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒 ,英文名: INHBP ELISA Kit

人免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA檢測試劑盒Humanimmunoglobulinheavychainvariableregion,IgHVELISAKit 96T/48T

大鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 10,IL-10 ELISA KIT

CLIAKitfoAP(Humanypsinogenactivationpeptide)ELISAKit人胰蛋白酶原激活肽規(guī)格:48T/96T

人體MMP9RFLP基因分析試劑盒20次

ELISAKitAFA/snoRNP/U3RNP人抗核仁纖維蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
腦膜炎球菌屬C型核酸(NM-C)檢測試劑盒人參皂苷F362025-50-7英文名:Ginsenoside F3  

英文別名:Dammarane, β-D-glucopyranoside deriv.  

登錄號:62025-50-7

分子式:C41H70O13

分子量:770.99

分子結(jié)構(gòu):

規(guī)格:20mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源:五加科植物人參(Panax ginseng)的干燥根。

藥理藥效:它具有較高的抗腫瘤活性,對正常細胞,與其他化療藥物(如順鉑)聯(lián)合應(yīng)用有協(xié)同作用。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年
PCR的反應(yīng)條件:
因擴增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小,設(shè)定25~30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少,擴增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預(yù)備實驗可2℃間隔進行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘;當溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴增產(chǎn)物;Anneal溫度太低時,容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外,Extension時間太短時,會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成;而Extension時間太長時,會出現(xiàn)Smear。

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