當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50TQ熱立克次(CB)體核酸檢測試劑盒
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
Q熱立克次(CB)體核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10462 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
假單胞菌用于阿特拉津農(nóng)藥廢水處理及受污染土壤的生物修復(fù)模式菌株: no廢水排污口土壤和廢水混合物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 858生長條件: 30℃
土壤短芽孢桿菌與其它菌株配合用于微生物采油模式菌株: no油田水樣提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 2生長條件: 40℃
根癌土壤桿菌培養(yǎng)基: 0476模式菌株: no土壤樣品提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 20℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
-658℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
石油棲熱腔菌還原元素硫模式菌株: no油水層提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0491生長條件: 65℃
偽狂犬病病教學(xué)研究模式菌株: no病豬提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
鏈霉菌 真空冷凍干燥法生長條件: 28℃提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 38
黃曲霉培養(yǎng)基: CM0085用于黃麻發(fā)酵,使麻軟化。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 定期移植法;其他
地下節(jié)桿菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: 831土壤提供形式: 凍干物模式菌株: no 真空冷凍干燥法
菲羅茄畢赤氏酵母培養(yǎng)基: 53模式菌株: no醬油沉淀物提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
-659℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種研究模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 396生長條件: 37
美澳型核果褐腐病菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no桃僵果提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 22-25 定期移植法
銅綠假單胞菌用于色素代謝相關(guān)基因的研究。模式菌株: noLB培養(yǎng)基提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃
熱帶假絲酵母近海酵母模式菌株: no生物樣/老皮海燕提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 513生長條件: 28℃
曲霉屬培養(yǎng)基: CM0014抗癌活性,抗菌活性提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥
2,5-二-4,6-二甲基煙 3,5-二-L-甲狀腺素 4-二基丁縮二乙醇
4,4'-二二砜 2-甲氧基噻吩 4-二基丁縮二
3-癸基噻吩 2-基噻吩 新戊醇
乙酰 4-丁縮二乙醇 1,5-二胺
Thiamphenicol 甲砜霉素 15318-45-3
L-Alaninol L-基丙醇 310399
Spectinomycin dihydrochloride pentahydrate 鹽大觀霉素五水合物 22189-32-8
NYLON 6 聚己內(nèi)酰胺粉 25038-54-4
大鼠抑制素βC(INHβC)ELISA試劑盒 ,英文名: INHβC ELISA Kit
Duck ierleukin 6 (IL-6) ELISA Kit 鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
MousePlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAkit 小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumandynamin2,DNM2ELISAKit人發(fā)動(dòng)蛋白2規(guī)格:48T/96T
5-羥色胺-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(SerotoninN-Acetylansferase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitEPOR大鼠紅生成素受體規(guī)格:48T/96T
Q熱立克次(CB)體核酸檢測試劑盒表沒食子兒茶素970-74-1英文名:(−)-Epigallocatechin
英文別名:epi-;(-)-EGC;(-)-EGC;NSC 674039;Sunphenon EGC;epigallocatechol;EPIGALLOCATECHIN;Galloepicatechin;Greenteacatechins;l-epigallocatechin
登錄號:970-74-1
分子式:C15H14O7
分子量:306.27
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色粉末
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:綠茶中提取得到。
溶解性:溶于,乙醇,不溶于。
熔點(diǎn):208-210°C
旋光度:-50 º (c=0.04, EtOH)
藥理藥效:具有很好的抗氧化活性,今年研究該化合物也具有一定的抗腫瘤活性。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
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