當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 細(xì)胞膜綠色熒光探針(DiO)
貨號(hào) | FS-X9774 |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
DiOC18(3) | 10mg | FS-X9774 |
產(chǎn)品介紹:
本探針是常用的細(xì)胞膜熒光探針之一,呈現(xiàn)綠色熒光。DiO是一種親脂性膜染料,進(jìn)入細(xì)胞膜后可以側(cè)向擴(kuò)散逐漸使整個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞膜被染色。DiO在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強(qiáng)的熒光。DiO被激發(fā)后可以發(fā)出綠色的熒光,DiO和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中,大激發(fā)波長為484nm,大發(fā)射波長為501nm。 :34215-57-1 分子式:C53H85ClN2O6 分子量:881.72 DiO可以溶解于無水乙醇、DMSO和DMF,溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時(shí)可以適當(dāng)加熱,并用超聲處理以促進(jìn)溶解。 DiO被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。DiO通常不會(huì)明顯影響細(xì)胞的生存力(viability)。DiO對于細(xì)胞膜染色的熒光強(qiáng)度通常要低于DiI,有時(shí)對于某些經(jīng)過固定的組織的染色效果欠佳。 DiO除了簡單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外,還可以用于檢測細(xì)胞的融合和粘附,檢測發(fā)育或移植過程中細(xì)胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。 用于細(xì)胞膜熒光標(biāo)記時(shí),DiO的常用濃度為1-30μM,常用的濃度為5-10μM。DiO可以直接染色活的細(xì)胞或組織,染色時(shí)間通常為5-20分鐘。對于固定的細(xì)胞或組織,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚進(jìn)行固定,使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?huì)導(dǎo)致熒光背景較高。 注意事項(xiàng):熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 儲(chǔ)存條件:4℃避光,有效期一年。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)英文名:BRCA2 分裂周期樣激2抗體包裝25g
乳鐵傳遞蛋白(LTF)英文名:LTF 分裂周期樣激3抗體包裝5g
乳脫氫B(LDHB)英文名:LDHB 17號(hào)染色體開放閱讀框49抗體包裝1g
乳過氧化物(LPO)英文名:LPO 17號(hào)染色體開放閱讀框53抗體包裝25g
肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移1A(CPT1A)英文名:CPT1A 17號(hào)染色體開放閱讀框57抗體包裝5g
肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移(CRAT)英文名:CRAT 17號(hào)染色體開放閱讀框64抗體包裝1g
融合蛋白(FUS)英文名:FUS 17號(hào)染色體開放閱讀框66抗體包裝250mg
溶質(zhì)載體家族30成員7(SLC30A7)英文名:SLC30A7 17號(hào)染色體開放閱讀框74抗體包裝1g
溶質(zhì)載體家族30成員6(SLC30A6)英文名:SLC30A6 17號(hào)染色體開放閱讀框75抗體包裝250mg
溶質(zhì)載體家族30成員5(SLC30A5)英文名:SLC30A5 17號(hào)染色體開放閱讀框77抗體包裝5g
溶質(zhì)載體家族30成員4(SLC30A4)英文名:SLC30A4 17號(hào)染色體開放閱讀框78抗體包裝1g
溶質(zhì)載體家族30成員3(SLC30A3)英文名:SLC30A3 維調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白抗體包裝5g
溶質(zhì)載體家族30成員10(SLC30A10)英文名:SLC30A10 17號(hào)染色體開放閱讀框42抗體包裝1g
溶質(zhì)載體家族30成員1(SLC30A1)英文名:SLC30A1 17號(hào)染色體開放閱讀框97抗體包裝250mg
溶血?;D(zhuǎn)移4(LPCAT4)英文名:LPCAT4 貓眼綜合征染色體候選基因1抗體包裝100g
猴頭菌Hericium│erinaceus (Bull.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒蔗糖;Sucrose
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:945-1030 ug /mg,二物轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒正丁基酞;3-n-Butylphath
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定轉(zhuǎn)谷酰2C多肽試劑盒知母皂B;Anemarsaponin
細(xì)胞膜綠色熒光探針(DiO)多主葡萄殼 3--2-甲氧基砒啶血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物
枯草芽孢桿 5--2-甲氧基吡啶血紅結(jié)合蛋白
瓜亡革 5-溴-2-甲氧基-3-硝基砒啶血紅氧合1
平菇 3-溴-2-甲氧基吡啶血漿α顆粒膜蛋白
木糖葡糖醋桿 鎢鈉血漿淀粉樣蛋白P
釀酒酵母 2,6-二苯甲血漿抗凝蛋白C
美澳型核果褐腐病 3-溴-2-羥基吡啶血漿抗凝蛋白S
鼠傷寒沙門氏 2-羥基-5-溴吡啶血漿絲蛋白抑制劑
殼 溴化鋰水合物血凝樣氧化低密度脂蛋白受體-1
熱帶假絲酵母 3,5-二氟-4-異氧基血清白蛋白
枇杷假尾孢褐斑病 4-羥基-6,7-二甲氧基喹啉血清低半乳糖化IgA1
香菇 間氟苯磺酰血清淀粉樣蛋白A
毛簇木霉 4-氨基-2-氟鹽鹽血清淀粉樣蛋白A1
解淀粉芽孢桿植物亞種 L-叔丁酯鹽鹽血清鐵
禽腺病 3,5-二水楊血清鐵蛋白
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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