當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T普氏立克次體(RP)核酸檢測試劑盒
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
普氏立克次體(RP)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10460 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
-653℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
史氏芽孢桿菌培養(yǎng)基: 2模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 50℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
日本慢生根瘤菌主要用于分類學研究模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 63生長條件: 28℃
葡孢霉屬培養(yǎng)基: CM0014生物轉(zhuǎn)化提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C -80℃冰箱凍結(jié)
鮑氏志賀氏菌培養(yǎng)基: CM0051C 11提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
北京擬土地桿菌培養(yǎng)基: 33有機污染物降解菌/酚、間甲酚降解菌(已驗證)沉積物/焦化廢水活性污泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: yes生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
釀酒酵母生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 0013提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-654℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
A438培養(yǎng)基: 0012模式菌株: no種屬: Streptomyces│lilacinus提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
慢生大豆根瘤菌培養(yǎng)基: 0053與大豆共生固氮,培養(yǎng)基pH4.3生長提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法;礦物油法
鰒發(fā)光桿菌共生微生物/未知海魚腸道共生菌;指示菌/發(fā)光細菌模式菌株: no生物樣/未知海魚腸道內(nèi)容物提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 33生長條件: 28℃
唾液乳桿菌水楊素亞種發(fā)酵面制品模式菌株: no面團提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0006生長條件: 30℃
大腸埃希氏菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: 2提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
舟狀單頂孢培養(yǎng)基: 18模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法
-655℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
平菇生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
3-基-1H-吡唑并[3,4-b] 6--5-硝基 3-
2-溴-3-酚 環(huán)氧丁烯 N-BOC-4-甲
3-基-2,6-二-5- 5-甲基異惡唑-4- N-甲基-N-(4-硝基氧乙基)-4-硝基乙胺
油酰單乙醇胺 2-溴醌 4-硝基乙胺鹽
TERT-BUTYL N-(2-HYDROXYETHYL)CARBAMATE N-(叔丁氧羰基)乙醇胺 26690-80-2
Rifampicin 利福平 13292-46-1
BOC-CYS(4-MEBZL)-OL BOC-CYSTEINOL(PMEBZL) 129397-85-9
BOC-CYS(BZL)-OL N-叔丁氧羰基-S-芐基-L-半胱醇 139428-96-9
大鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 ,英文名: INH-B ELISA Kit
人免疫球蛋白重鏈(IgH)ELISA檢測試劑盒Humanimmunoglobulinheavychain,IgHELISAKit 96T/48T
大鼠白蛋白免疫試劑盒 Rat albumin ELISA Kit
CLIAKitfoAPELISAKit大鼠胰蛋白酶原激活肽規(guī)格:48T/96T
人體NK分離試劑盒10次
ELISAKitANA人抗核仁抗體規(guī)格:48T/96T
普氏立克次體(RP)核酸檢測試劑盒積雪草苷16830-15-2中文別名:亞細亞皂苷,積雪草甙
英文名:Asiaticoside
登錄號:16830-15-2
分子式:C48H78O19
分子量:959.12
分子結(jié)構(gòu):
外觀:淡黃色結(jié)晶
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:傘形科植物積雪草Centella asiatica (L. ) Urban 的全草
溶解性:在水、乙醇中易溶,在與中不溶。
熔點:235℃-238℃
旋光度:-14 °(EtOH)
藥理藥效:有促進創(chuàng)傷愈合作用。用于治療外傷,手術(shù)創(chuàng)傷,燒傷,疤痕疙瘩及硬皮病。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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