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貨號 | FS-X10265 |
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中文名稱:EGFR抑制劑(AZD-9291)
英文名稱:AZD-9291
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
貨號:FS-X10265
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:AZD-9291 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg AZD-9291是不可逆的突變體選擇性EGFR抑制劑;對EGFRL858R和EGFRL858R/T790M的IC50值分別為12和1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1421373-65-0 別名:Osimertinib;Mereletinib 純度:99.95% 分子量:499.61 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
嗜熱鏈球菌白介1受體9抗體Human RPL32 羊胰島樣生長因子II(IGF2)免疫試劑盒
勒氏寡食單胞菌RasGTP激活蛋白IQGAP3抗體Human RPL35 羊水通道蛋白5(AQP5)免疫試劑盒
蘋果交鏈孢Iroquois同源蛋白1抗體Human RPL10A 羊生長分化因子9(GDF9)免疫試劑盒
阪崎腸桿菌跨膜蛋白BRI抗體Human RPL11 羊溶菌(LZM)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌跨膜蛋白ITM2C抗體Human RPL12 羊抗單鏈DNA抗體/變性DNA(ssDNA)抗體免疫試劑盒
嗜熱脂肪地球芽胞桿菌白介31抗體Human RPL13A 羊環(huán)磷腺(cAMP)免疫試劑盒
微小毛霉人血清型免疫球蛋白A抗體Human RPL15 羊環(huán)磷鳥(cGMP)免疫試劑盒
綠針假單胞菌Irx3蛋白抗體Human RPL14 羊促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)免疫試劑盒
斯氏假單胞菌頂端體蛋白10抗體Human KYNU(Kynureninase) 羊白介7(IL7)免疫試劑盒
日本根霉人分泌型免疫球蛋白AHuman RPL18A 羊α晶體B鏈(CRYAB)免疫試劑盒
球形賴芽孢桿菌胰島自身抗原1抗體Human RPL17 鴨
蠟?zāi)僖葝u基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白2抗體Human RORB 鴨子神經(jīng)肽Y(NP-Y)免疫試劑盒
黑曲霉白介-16抗體Human RPL19 鴨子磷化腺活化蛋白激(pAMPK)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌離子鈣接頭蛋白抗體Human RP2 鴨子催乳(PRL/LTH)免疫試劑盒
擬黑馬朗假絲酵母Iroquois同源蛋白4抗體Human CYP7A1(Cholesterol 7-alpha-monooxygenase) 鴨子鼠相關(guān)蛋白(AGRP)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌干擾相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體(神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白PC4)Human RPA2 鴨生長激1(GH1)免疫試劑盒
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%重樓皂VI
泡囊短波單胞菌Brevundimonas│vesicularis 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%鼠尾草
海產(chǎn)堿菌Alcaligenes│aquamarinus 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=5%重樓皂II
EGFR抑制劑(AZD-9291)Porifericola 1-硝基吡唑黃腺二核
黑曲霉 2,3-二氟-4-甲氧基雌馬
美澳型核果褐腐病 噻吩-2,3-二羧氨酰膜氨基肽CD13
黃單胞 1,3-二-5-白脂
蠟狀芽孢桿 N-CBZ-2-甲嗜性選擇性趨化因子3
大腸埃希 4-氨基-2-甲氧基嘧啶肝黃單加氧
糙皮側(cè)耳 2-苯基噻唑-4-羧肝黃單加氧
黑曲霉 2--6-氟-3-甲二氧化硫
松球殼孢 鹽小病IgA抗體
黑根霉 苯并噁二唑-4-甲細(xì)小病IgM抗體
盤長孢狀盤孢 4-叔丁基40s核糖體蛋白s19
香蕉生假絲酵母 抗肝腎微粒體抗體
果生鏈核盤 (4R,5R)-(-)-2,2-二甲基-ALPHA,ALPHA,ALPHA,ALPHA-四苯基-1,空泡相關(guān)蛋白A
長谷川赤擔(dān)孢酵母 (S)-5-羥甲基二-2-酮胃蛋白原C
地錘屬 1-金剛烷甲甲酯角蛋白19片段
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