當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> Toll樣受體激動劑(TLR8激動劑)(Motolimod)
貨號 | FS-X10439 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Toll-like receptor Agonist 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg Motolimod選擇性的Toll樣受體(Toll-like receptor,TLR8)激動劑,EC50約為100nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:926927-61-9 別名:VTX-2337;VTX-378 純度:98.83% 分子量:458.6 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱:Toll樣受體激動劑(TLR8激動劑)(Motolimod)
英文名稱:Toll-like receptor Agonist
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
貨號:FS-X10439
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
灰樹花磷化血小板源性生長因子受體αAnti-CD209 AntibodyAgouti相關(guān)蛋白(AGRP)
果蠅克魯維酵母兒茶氧化PPO抗體Anti-CD24 AntibodyAFG3樣蛋白2(AFG3L2)
云芝蛋白激C抗體Anti-CD244 AntibodyAdropin(ENHO)
白囊耙齒菌脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體Anti-CD244 AntibodyADP-核糖基化因子5(ARF5)
王氏薄孔菌多聚腺結(jié)合蛋白抗體Anti-CD274 AntibodyADP-核糖基化因子4(ARF4)
焦瑞身氏溶桿菌核纖層蛋白A相關(guān)結(jié)構(gòu)蛋白1抗體Anti-CD274 AntibodyADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)
冷彎曲菌PCID2蛋白抗體Anti-CD2AP AntibodyⅣ型前膠原肽(PⅣNP)
三葉草根瘤菌腺硫激1抗體Anti-CD27 Antibody(PB0974)Ⅳ型前膠原基末端肽(PⅣNP)
謝瓦散囊菌腺硫激2抗體Anti-CD2AP AntibodyⅣ型膠原(Col Ⅳ)
Winogradskyella multivorans 蛋白激活受體3抗體Anti-CD274 AntibodyⅣ型膠原(Ⅳ-C)
黑曲霉MAWD結(jié)合蛋白抗體Anti-CD274 AntibodyⅢ型前膠原肽(PⅢP)
蠟樣芽孢桿菌PCID1蛋白抗體Anti-CD2AP AntibodyⅢ型前膠原肽(PⅢNP)
黑姬菇PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白抗體Anti-CD30/TNFRSF8 AntibodyⅢ型前膠原基末端肽(PⅢNP)
白橙蓋鵝膏菌吡哆激抗體Anti-CD33 AntibodyⅢ型前膠原基端肽(PⅢNT)
黃溶鏈霉菌PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK1蛋白抗體Anti-CD34 AntibodyⅢ型前膠原C端肽(PⅢCP)
Sphingomonas yunnanensis前列腺癌激活蛋白抗體Anti-CD33 Antibody(PB0975)Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
: AS1.196資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
白假絲酵母Candida│albicans 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),BR
Toll樣受體激動劑(TLR8激動劑)(Motolimod)食屬 己基溴化鎂溶液甘-L
淡色生赤殼 (R)-(+)-1,2-環(huán)氧丁烷天門冬-L
果蔬汁 死蜱、菊酯、多效唑、 噠螨靈 1H-吡唑-3-雷帕霉靶蛋白C1
針孢鏈霉 鹽呋喃它酮雷帕霉靶蛋白C2
枯草芽孢桿 2-基苯乙磷化P38蛋白
菜豆擬莖點(diǎn)霉 全氟-1-丁磺胰島樣生長因子1受體
腸桿屬 BOC-D-3-(4-吡啶基)-α酮戊二
工業(yè)堿速測包(用于水發(fā)產(chǎn)品) D-3-(2-吡啶基)-饑餓
立枯絲核 3-(4-吡啶基)-D-氧化還原
冬蟲夏草 3-(4-吡啶基)-L-雄結(jié)合蛋白
耐熱鹽土生古 甲基二酰砷劑3-氧化位甲基轉(zhuǎn)移
明尼蘇達(dá)被毛孢 3,6-二叔丁基咔唑磷化核因子κB抑制蛋白α
枯草芽孢桿 2-羥甲基-3,4-二氫吡喃色C
大腸埃希氏 亞硫亞乙酯Ca-Mg-ATP
球孢白僵 2-羥基-5-溴吡糖基化血紅蛋白
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