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當前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞組織染色>> 茜素紅S染色試劑盒
| 貨號 | FS-X9758 |
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產(chǎn)品介紹:
茜素紅S染色試劑中的茜素紅S可通過與鈣離子和其他金屬離子發(fā)生鰲和反應而形成可以在顯微鏡下直接觀察的帶顏色的復合物。本產(chǎn)品就是基于此原理而開發(fā)。 產(chǎn)品特點： 1．即開即用，用戶不需要單獨準備各種溶液。 2．操作簡捷，性能穩(wěn)定，顯色清晰。 3．可用于組織切片中的鈣沉積，尤其適用于骨細胞或組織的病理和生理研究。 4．可用于檢測動物原生代或培養(yǎng)細胞的鈣沉積。 5．本產(chǎn)品為通用型，不但用于鈣離子的檢測，還可用于FeCl2和CdCl2的檢測。 儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。 |
中文名稱：茜素紅S染色試劑盒
英文名稱：Alizarin Red S Staining Kit
產(chǎn)品規(guī)格：100mL
貨號：FS-X9758
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
血小板反應蛋白(THBS1)英文名：THBS1 色CYP3A抗體包裝25g
血栓調節(jié)蛋白(TM)英文名：TM 色cP450 CYP20A1抗體包裝5g
血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)英文名：SAA2 色cP4501B1抗體包裝1g
血清淀粉樣P物質(SAP)英文名：SAP 色cP450 CYP26A1抗體包裝5g
血紅氧合2(HO2)英文名：HO2 磷化周期E抗體包裝100mg
血紅氧合1(HO1)英文名：HO1 磷化周期E2抗體包裝5g
血紅蛋白(HB)英文名：HB 周期M3抗體包裝1g
血管抑(ANG)英文名：ANG 周期Y/X抗體包裝250mg
血管性血友病因子(vWF)英文名：vWF 磷化周期D3抗體包裝1g
血管細胞粘附分子1(VCAM1)英文名：VCAM1 色b5還原3抗體包裝1g
血管生成樣蛋白7(ANGPTL7)英文名：ANGPTL7 CWC22蛋白抗體包裝250mg
血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)英文名：ANGPTL3 9號染色體開放閱讀框95抗體包裝5g
血管生成樣蛋白2(ANGPTL2)英文名：ANGPTL2 19號染色體開放閱讀框67抗體包裝10MG
血管生成樣蛋白1(ANGPTL1)英文名：ANGPTL1 磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體包裝100ml
血管生成4(ANGPT4)英文名：ANGPT4 原卟啉氧化3抗體包裝25ml
ADP核糖基化因子結合蛋白抗體泛交叉反應蛋白(UCRP)N/A
茜素紅S染色試劑盒細鏈格孢 檸檬二鈉鹽絲裂原活化蛋白激4
暗擬莖點霉（可訂購） 檸檬哌水合物絲裂原激活的蛋白激;MAP激
產(chǎn)卟啉桿 9,9'-螺二芴斯鈣1
產(chǎn)黑鏈霉 2-溴-4,5-二氟斯鈣2
針葉樹散斑殼 4-咪唑死亡受體3
球孢白僵 3,4-二氟死亡受體5
葡萄座腔 4,5-二咪唑四氫生物蝶呤
稻生黃單胞 4,4-二氟鹽鹽松弛H2
球孢白僵 (1R,2S)-1-叔丁氧羰基氨基-2-乙烯基環(huán)烷甲松弛肽;松弛
強壯根瘤 2-溴-6-氟吡啶性成纖維生長因子
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇) 3-吡啶基偕肟性成纖維生長因子1
日本色鹽桿 2--1-嗎琳乙-1-酮髓過氧化物
運動節(jié)桿 乙酰乙乙酯鈉鹽髓過氧化物特異性抗中性粒胞質
腐皮鐮孢 三(2,4-戊二酮)銦(III)髓鞘堿性蛋白
新鞘氨 4-氨基-2--5-甲基嘧啶髓鞘堿性蛋白抗體
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