實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

PCR技術的定量原理：
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擴增曲線
在Real-time qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
AFAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒aFGF-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒aFGF-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)ELISA試劑盒AflatoxinELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒AFPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒AFPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒AFPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒AFPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒AFP-L1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒AFP-L2ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒AFP-L3ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒AFUELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒AFUELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒AFUELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒AFUELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒AGAAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒AGAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒AGEsELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠P物質(SP)ELISA試劑盒AGEsELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒AGEsELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒AGEsELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠γ氨基丁(GABA)ELISA試劑盒Ag-NORsELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠乙酰膽受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒AGPA/PCAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠丙激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒AGPsELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠半胱氨蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒AGRPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒aGTELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠骨特異性性磷酶B(ALP-B)ELISA試劑盒aGTELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠骨橋素(OPN)
豬流行性腹瀉病毒核酸檢測試劑盒人叉頭框蛋白01(FoxO1)ELISA試劑盒TNF-αELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人叉頭框蛋白02(FoxO2)ELISA試劑盒TNF-αELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人叉頭框蛋白03(FoxO3)ELISA試劑盒TNF-αELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒TNF-αELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人整合素αⅤβ3(IntegrinαⅤβ3)ELISA試劑盒TNF-βELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒TNF-βELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)ELISA試劑盒TNF-βELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人ω干擾素(IFN-ω)ELISA試劑盒TN-RELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。