維甲酸X受體激動劑(RXR激動劑)-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號	FS-X10513

中文名稱：維甲酸X受體激動劑(RXR激動劑)

英文名稱：Bexarotene

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|50mg|100mg|500mg

貨號：FS-X10513

產(chǎn)品介紹:

英文名稱：Bexarotene

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|50mg|100mg|500mg

Bexarotene(Targretin)是維甲酸X受體（RXR）激動劑，可作用于CTCL。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：153559-49-0

純度：99.89%

分子式：C??H??O?

分子量：348.48

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

乳鏈球菌腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白3相互作用蛋白1抗體Anti-HSPA9 Antibody脫氧鳥激(DGUOK)

熱帶假絲酵母四連接TN抗體Anti-HSPB1 Antibody脫氧核糖核Ⅹ(DNASEⅩ)

厚垣鐮孢菌Toll樣受體1抗體Anti-HSPA9 Antibody脫氧核糖核Ⅱ(DNASEⅡ)

鼠李糖乳桿菌DNA拓普西異構(gòu)ⅡA抗體Anti-HSPB2 Antibody脫氧核糖核Ⅰ樣2(DNASE1L2)

枯草芽孢桿菌三葉肽因子2抗體Anti-HSPB1 Antibody(PB0218)脫氧核糖核Ⅰ(DNASE1)

曲霉端粒結(jié)合蛋白2抗體Anti-HSPB8 Antibody脫氧輔蛋白羥化/單加氧(DOHH)

多主葡萄殼菌形成相關(guān)凋亡蛋白7抗體Anti-HSPB2 Antibody脫氧輔蛋白合(DHPS)

鞘單胞菌端粒相關(guān)蛋白1抗體Anti-HSPB8 Antibody脫氧吡啶(DPD)

康寧木霉谷酰轉(zhuǎn)3抗體Anti-HSPB6 Antibody脫氧胞激(DCK)

構(gòu)巢曲霉環(huán)指蛋白92抗體Anti-HSPD1 Antibody脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(apoTf)

根霉環(huán)指蛋白調(diào)節(jié)蛋白激C蛋白抗體Anti-HSPE1 Antibody褪黑受體1B(MTNR1B)

沉積物鹽坑微菌TRIM50蛋白抗體Anti-HSPBAP1 Antibody褪黑受體1A(MTNR1A)

紫麥角菌環(huán)指蛋白88抗體Anti-HSPG2 Antibody突觸足蛋白(SYNPO)

大豆慢生根瘤菌鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體Anti-HSPD1 Antibody(PB0301)突觸(SYP)

食物芽孢桿菌環(huán)指蛋白98抗體Anti-HSPH1 Antibody突觸伸蛋白2(SYNJ2)

大腸埃希菌環(huán)指蛋白16抗體Anti-HSPG2 Antibody(PB0302)突觸伸蛋白1(SYNJ1)

RhoGTP激活蛋白13抗體檸檬桿菌屬人牙周膜成纖維細(xì)胞

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體靈芝人前脂肪細(xì)胞

轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM1抗體糙皮側(cè)耳小鼠成骨細(xì)胞

核轉(zhuǎn)錄因子SOX14抗體膠韌革菌(榆耳，榆蘑)小鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞
維甲酸X受體激動劑(RXR激動劑)短桿狀馬賽 2-氨基腺核黑色

栗酒裂殖酵母 N'N-二(4-磺丁基)-3,5-二二鈉鹽(MADB)表皮生長因子受體

核盤 5-溴-6--3-辛酯白介12

棕色固氮 3-氟-5-羥基吡啶5羥色

肉色迷孔 4-氨基-2-苯甲神經(jīng)生長因子

PL101百平 Fmoc-β-homoaspartic acid腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子

解淀粉芽孢桿胸腺嘧啶-1-乙多巴

釀酒酵母果糖二酮組

枯草芽孢桿 5-(甲基硫代）噻吩-2-羧誘導(dǎo)型NO合

帚復(fù)孢枝接霉 5-硝基-2-酮可溶性間粘附分子1

擬郎比可假絲酵母 5-溴-2-羥可溶性血管內(nèi)皮粘附分子1

不解糖假蒼白桿 N,N'-二叔丁氧羰基-L-組E選擇

化妝品 4-羥基甲酯、苯氧基乙、 4-羥基酯 3-甲基-2-丁硫17α羥化

樺剝管孔二甲基烯1,4-丁二酯21羥化

果生鏈核盤 4'-氟-3'-(三氟甲基)苯乙酮基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1

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