產(chǎn)品介紹:

中文名稱：PI3Kα抑制劑(BYL-719)

英文名稱：BYL-719

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

貨號(hào)：FS-X10298

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

中國漢納酵母鋅指蛋白103抗體Human POLM 血管緊張1-7(Ang1-7)

沙福芽孢桿菌纖維母生長因子7抗體Human POLR1C 血管緊張(ANG)

大豆慢生根瘤菌肺Kruppel樣因子抗體Human POLR1A 血管活性肽抑制劑(VPI)

希瓦氏菌*激肽釋放5抗體Human POLR2J 血管活性腸肽(VIP)

白乳菇激肽釋放13抗體Human POLE3 血管動(dòng)蛋白(AMOT)

Termitomyces bulborhizus 激肽釋放15抗體Human POLG2 旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)

白假絲酵母激肽釋放2抗體Human POLI 溴脫氧核(BrdU)

根霉激肽釋放12抗體Human POLM 雄烯二(ASD)

雞、滑液支原體（-）陰性血清G蛋白偶聯(lián)受體54抗體Human POLR1A 雄激受體(AR)

耐冷冷桿菌驅(qū)動(dòng)蛋白家族KIF17抗體Human POLR1C 雄激結(jié)合蛋白(ABP)

臭曲霉轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體Human POLR1D 胸腺依賴性抗原(TD-Ag)

皮狀絲孢酵母上皮特異性蛋白1抗體Human POLR1E (TP-5)

西藏木霉磷化離子通道蛋白Kv3.1抗體Human POLG2 β4(Thymosin β4)

科羅拉多擬無枝菌周期基因1蛋白抗體Human POLI α1(Thymosin α1)

粒狀青霉驅(qū)動(dòng)蛋白KIF5B抗體Human PNRC1 (Thymosin)

木耳kelch樣蛋白13抗體Human LTC4S(Leukotriene C4 synthase) 胸腺嘧啶核磷化(TP)

不解糖假蒼白桿菌Pseudochrobactrum│asaccharolyticum 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

哲拉什黃桿菌Flavobacterium│degerlachei 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)化兩面針堿

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)血根堿
PI3Kα抑制劑(BYL-719)糞腸球* 2-氨基苯乙集落激因子1

日本色鹽桿 4-甲甲酯高密度脂蛋白2

解鳥克雷伯 6--咪唑并[1,2-b]吡-3-甲高密度脂蛋白3

綠色鏈霉 3-氨基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶Trim22分子

多粘類芽孢桿 5-溴煙甲酯NADPH氧化4

枯草芽孢桿 2-氮己環(huán)酮G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1

叢毛紅曲 3,5-二甲基吡唑溶血磷脂酰?；D(zhuǎn)移1

腐質(zhì)霉 4-氟-3-三氟甲基芐酰基氧化

傘枝犁頭霉 3-(3-嗎啉氧基)-4-甲氧基芐NADPH氧化4

迪吉氏黃桿 3-噻吩-2-甲還原型輔Ⅰ

木賊鐮刀 ZONYL(R) FSP煙酰腺二核

Sphingobium fuliginis  5-氟-2-甲氧基苯磺酰外基質(zhì)蛋白1

土曲霉 2,4,6-三羥苯乙酮偽狂犬病

鶴羽田戴爾福特 4-甲氧基水楊酰脈絡(luò)叢腦膜炎病

無色殼囊孢 5-溴-2--3-硝基吡啶一氧化氮合成1