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PI3Kα抑制劑(BYL-719)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 11:08:16瀏覽次數:177次

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貨號 FS-X10298
PI3Kα抑制劑(BYL-719)正在熱銷的產品:p-Nrf2/FITC 熒光標記化核因子2相關因子2抗體IgG二二丁 CP
Nrn1/Cpg15/FITC 熒光標記轉化神經突起蛋白抗體IgG二丁 光譜純
CD303/BDCA-2/CLEC4C 熒光標記C型凝集結構域家族4成員C抗體IgG二丁 for HPLC-GC, ≥99.5% (GC)
CD304/BDCA-4/NRP-1 /FITC

產品介紹:

英文名稱:BYL-719

產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

BYL-719是一種有效的選擇性PI3Kα抑制劑,IC50為5nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:1217486-61-7

別名:Alpelisib

純度:99.04%

分子量:441.47

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:PI3Kα抑制劑(BYL-719)

英文名稱:BYL-719

產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

貨號:FS-X10298

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中國漢納酵母鋅指蛋白103抗體Human POLM 血管緊張1-7(Ang1-7)

沙福芽孢桿菌纖維母生長因子7抗體Human POLR1C 血管緊張(ANG)

大豆慢生根瘤菌肺Kruppel樣因子抗體Human POLR1A 血管活性肽抑制劑(VPI)

希瓦氏菌*激肽釋放5抗體Human POLR2J 血管活性腸肽(VIP)

白乳菇激肽釋放13抗體Human POLE3 血管動蛋白(AMOT)

Termitomyces bulborhizus 激肽釋放15抗體Human POLG2 旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)

白假絲酵母激肽釋放2抗體Human POLI 溴脫氧核(BrdU)

根霉激肽釋放12抗體Human POLM 雄烯二(ASD)

雞、滑液支原體(-)陰性血清G蛋白偶聯(lián)受體54抗體Human POLR1A 雄激受體(AR)

耐冷冷桿菌驅動蛋白家族KIF17抗體Human POLR1C 雄激結合蛋白(ABP)

臭曲霉轉錄因子KLF9抗體Human POLR1D 胸腺依賴性抗原(TD-Ag)

皮狀絲孢酵母上皮特異性蛋白1抗體Human POLR1E (TP-5)

西藏木霉磷化離子通道蛋白Kv3.1抗體Human POLG2 β4(Thymosin β4)

科羅拉多擬無枝菌周期基因1蛋白抗體Human POLI α1(Thymosin α1)

粒狀青霉驅動蛋白KIF5B抗體Human PNRC1 (Thymosin)

木耳kelch樣蛋白13抗體Human LTC4S(Leukotriene C4 synthase) 胸腺嘧啶核磷化(TP)

不解糖假蒼白桿菌Pseudochrobactrum│asaccharolyticum 質量規(guī)格:>98.0%(T)

哲拉什黃桿菌Flavobacterium│degerlachei 質量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)化兩面針堿

大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規(guī)格:>98.0%(GC)血根堿
PI3Kα抑制劑(BYL-719)糞腸球* 2-氨基苯乙集落激因子1

日本色鹽桿 4-甲甲酯高密度脂蛋白2

解鳥克雷伯 6--咪唑并[1,2-b]吡-3-甲高密度脂蛋白3

綠色鏈霉 3-氨基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶Trim22分子

多粘類芽孢桿 5-溴煙甲酯NADPH氧化4

枯草芽孢桿 2-氮己環(huán)酮G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1

叢毛紅曲 3,5-二甲基吡唑溶血磷脂酰?;D移1

腐質霉 4-氟-3-三氟甲基芐酰基氧化

傘枝犁頭霉 3-(3-嗎啉氧基)-4-甲氧基芐NADPH氧化4

迪吉氏黃桿 3-噻吩-2-甲還原型輔Ⅰ

木賊鐮刀 ZONYL(R) FSP煙酰腺二核

Sphingobium fuliginis  5-氟-2-甲氧基苯磺酰外基質蛋白1

土曲霉 2,4,6-三羥苯乙酮偽狂犬病

鶴羽田戴爾福特 4-甲氧基水楊酰脈絡叢腦膜炎病

無色殼囊孢 5-溴-2--3-硝基吡啶一氧化氮合成1

 


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