13524666654
當(dāng)前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> GE Ficoll-Paque PLUS淋巴細(xì)胞分離液
| 貨號 | FS-X9756 |
|---|
產(chǎn)品介紹:
Ficoll-Paque PLUS是經(jīng)驗證可在實驗室廣泛應(yīng)用的人淋巴細(xì)胞分離液，分離人淋巴細(xì)胞用于體外研究。Ficoll-Paque PLUS是一種即開可用的無菌分離液，優(yōu)化的分離液密度可從周圍血液中獲得高產(chǎn)率的淋巴細(xì)胞，并可以維持B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的生長和分布。低水平內(nèi)毒素含量(<0.12 EU/ml)。Ficoll-Paque PLUS培養(yǎng)基包含聚蔗糖(Ficoll PM400, 5.7g)，二乙酰氨基三碘苯甲酸(9.0g)和乙底酸鈣二鈉。產(chǎn)品可應(yīng)用于組織相容性試驗，細(xì)胞介導(dǎo)免疫檢測等。#17-1440-02 Ficoll-Paque PLUS為6瓶裝，每瓶100ml。 檢測原理：去纖維蛋白或抗凝血劑處理的血液在Ficoll-Paque PLUS分離液中分層，離心分離后，管底部含有聚集的紅細(xì)胞，紅細(xì)胞層上面一層含有大量粒性白細(xì)胞，而淋巴細(xì)胞停留在血漿和Ficoll-Paque PLUS界面處(同時含有沉淀微粒血小板和單核細(xì)胞)?；厥战缑嫣幜馨图?xì)胞，用平衡鹽溶清洗去除血小板、Ficoll-Paque PLUS分離液和血漿。 保存溫度：4-30℃ 應(yīng)用： 細(xì)胞分離 產(chǎn)品特性： 物理狀態(tài)：無色液體 大密度：1.078 g/ml pH范圍：5.5-7.5 內(nèi)毒素活性：< 0.12 EU/ml 從人周圍血液中分離淋巴細(xì)胞 保質(zhì)期：3年 |
中文名稱：GE Ficoll-Paque PLUS淋巴細(xì)胞分離液
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100ml
貨號：FS-X9756
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)英文名：IGFBP6 磷化EGF應(yīng)答因子1抗體包裝25g
胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)英文名：IGFBP4 β抗體包裝5g
胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)英文名：IGFBP3 磷化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體包裝25g
胰島樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)英文名：IGFBP2 ARF鳥交換因子BIG1抗體包裝5g
胰島樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)英文名：IGFBP1 腦特異性同源蛋白BSX抗體包裝1g
胰島樣生長因子2(IGF2)英文名：IGF2 鋅指蛋白47抗體包裝25g
胰島樣生長因子1(IGF1)英文名：IGF1 ?BTBD14A蛋白抗體包裝5g
胰島樣蛋白6(INSL6)英文名：INSL6 鋅指蛋白851抗體包裝25g
胰島樣蛋白5(INSL5)英文名：INSL5 嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體包裝5g
胰島樣蛋白3(INSL3)英文名：INSL3 磷化c-fos抗體包裝100g
胰島受體底物2(IRS2)英文名：IRS2 磷化c-fos抗體包裝25g
胰島受體底物1(IRS1)英文名：IRS1 磷化原癌基因c-Jun抗體包裝500g
胰島受體(ISR)英文名：ISR 磷化原癌基因c-kit抗體包裝5ml
一氧化氮合運輸因子(NOSTRIN)英文名：NOSTRIN 1號染色體開放閱讀框148抗體包裝1g
葉受體1(FOLR1)英文名：FOLR1 性T抗原-4抗體包裝5g
去整合樣金屬蛋白23抗體白介21(IL21)MK-801 (Dizocilpine) is a potent N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor antagonist
GE Ficoll-Paque PLUS淋巴細(xì)胞分離液球孢毛霉 2-吡啶甲酰視黃
類芽胞桿 2,5-二溴-3-吡啶視錐蛋白樣蛋白1
腐霉 噻唑-5-甲嗜鉻粒蛋白A
芽孢桿屬 咪唑-2-甲嗜環(huán)蛋白;親環(huán)A
側(cè)耳 2-巰基嘧啶嗜環(huán)蛋白;親環(huán)B
果生鏈核盤 (3,5-二甲基吡唑-1-基)乙嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1
貝倫格葡萄座腔 坎地沙嗜活化趨化因子3
大腸埃希氏 1-甲基-1H-吡唑-5-羧嗜性粒趨化蛋白
微黃漢納酵母 2--9,9-二甲基芴嗜性粒趨化蛋白
豬丹絲 4-溴-3-甲乙酯嗜性粒陽離子蛋白
硬結(jié)節(jié)桿 2-溴-5-甲苯嗜異性抗體
大腸桿屬 2,5,6-三氨基-4-磺基嘧啶受體TNFRSF結(jié)合絲蘇激2
pcDNA6/V5-His A 2,8-二喹啉-3-甲瘦
叢花青霉 N-甲基-1-萘瘦受體
棉花新鞘氨 2-(2-甲氧基乙氧基)乙舒
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
儀表網(wǎng)