VEGFR3抑制劑(SAR131675)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X10798

中文名稱：VEGFR3抑制劑(SAR131675)

英文名稱：SAR131675

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

貨號：FS-X10798

產(chǎn)品介紹:

SAR131675是有效，選擇性的VEGFR3抑制劑，IC50值為23nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：1433953-83-3

純度：99.80%

分子量：358.39

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

栗疫菌人巨噬趨化因子Anti-MRPS18A Antibody人單純皰疹病抗原2(HSV-Ag2)

金針菇小鼠c-junAnti-MRPS2 Antibody人單純皰疹病抗原2(HSV-Ag2)

嗜中溫寒冷桿菌人α/β干擾受體Anti-MRPS24 Antibody人游離前列腺特異性抗原(fPSA)

釀酒酵母大鼠骨堿性磷Anti-MRPS22 Antibody人游離前列腺特異性抗原(fPSA)

銀白離褶傘槐凝集Anti-MRPS21 Antibody人前列腺特異性抗原(PSA)

果生鏈核盤菌兔血管內(nèi)皮粘附分子1Anti-MRPS25 Antibody人前列腺特異性抗原(PSA)

原小單胞菌花生凝集Anti-MRPS30 Antibody人磷脂酰絲(PS)

雞傷門氏菌人B生長因子Anti-MRPS27 Antibody人磷脂酰絲(PS)

Flavihumibacter兔血纖蛋白原Anti-MRPS25 Antibody人磷甘油酯(PC/CPG)

瓶形毛殼大鼠凝聚Anti-MRPS34 Antibody人磷甘油酯(PC/CPG)

惡臭假單胞菌小鼠抗透明帶抗體Anti-MRPS33 Antibody人總膽汁(TBA)

繩狀籃狀菌人B分化因子Anti-MRPS35 Antibody人總膽汁(TBA)

異常威克漢姆酵母兔子D二聚體Anti-MRPS36 Antibody人載脂蛋白C3(Apo C3)

枯草芽孢桿菌大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β激蛋白22Anti-MRPS9 Antibody人載脂蛋白C3(Apo C3)

冠突曲霉小鼠粘蛋白/粘液7Anti-MRPS7 Antibody人膽固(CH)

嬰兒芽胞桿菌大豆凝集Anti-MRPS5 Antibody人膽固(CH)

12號染色體開放閱讀框52抗體多年擬層孔小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞與大鼠膠質(zhì)瘤細胞之融合細胞

梅克爾憩室綜合征相關(guān)蛋白5抗體松生擬層孔菌人結(jié)腸腺癌細胞

β1,3-N-乙酰糖基轉(zhuǎn)移抗體扁芝人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤

受體活性修飾蛋白2抗體松杉靈芝人子宮內(nèi)膜腺癌(轉(zhuǎn)移)細胞
VEGFR3抑制劑(SAR131675)釀酒酵母 3-(芐基氨基)乙酯淀粉

植物乳桿土霉麥芽提取物瓊脂培養(yǎng)基胃蛋白

黑根霉馬鈴薯液體培養(yǎng)基（含霉）纖維

小孢擬盤多毛孢含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂（TSA-YE）顆粒核因子κB抑制蛋白α

肉桂色曲霉 4-溴-2-氟苯甲激動異構(gòu);分裂MB

伏克盾殼霉 RV沙門增液體培養(yǎng)基（中國藥典）ATP

芽殖酵母硝鹽蛋白胨水培養(yǎng)基肌紅蛋白

冷溫木拉克酵母改良察氏液體培養(yǎng)基促胰液

污水德沃斯氏 4-氟-3-三氟膽囊收縮

聚生殼 2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑抑胃肽

地衣芽孢桿 2-甲基-2-噻唑啉胃動

香菇 3,4-二甲氧基肉桂XIIa

厚環(huán)乳牛肝 4-乙酰氧基XIa

橄欖色毛殼 N,N'-二甲基-9,9'-聯(lián)吖啶鎓硝鹽CD41a

果生鏈核盤 TB培養(yǎng)基間粘附分子4

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