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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 膠原酶II型
貨號(hào) | FS-X9752 |
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產(chǎn)品介紹:
本品為II型膠原酶,≥125 U/mg solid,可用于心、甲狀腺、唾液腺、肝、骨、軟骨等組織和細(xì)胞的解離。本品來(lái)源于溶組織梭菌(Clostridium histolyticum),是一種酶粗提物,不僅含有膠原酶(更準(zhǔn)確的稱法為梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能夠降解天然膠原和網(wǎng)狀纖維。還含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分別能夠有效水解結(jié)締組織和上皮組織細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)的其他蛋白,多糖和脂質(zhì),使得本品非常適用于組織消化。 膠原酶(Collagenase)是一種蛋白酶,一種肽鏈內(nèi)切酶,能夠特異性的識(shí)別Pro-X-Gly-Pro序列(該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中,很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中)并切割該序列中性氨基酸(X)和甘氨(Gly)之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽,但膠原酶是一種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶,這種膠原纖維廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)。 目前商業(yè)化提供的細(xì)菌膠原酶主要根據(jù)膠原酶活性的差異,分為四種類型:膠原酶I型,II型,III型和IV型,在應(yīng)用上有所偏向: 1)膠原酶I(Type I Collagenase):含有比較均勻的各種酶活力(包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白活性)。通常用作上皮細(xì)胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的制備; 2)膠原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來(lái)源細(xì)胞的制備; 3)膠原酶III(Type III Collagenase):含有較低的蛋白酶活性,常用于乳腺細(xì)胞的制備; 4)膠原酶IV(Type IV Collagenase):含有低活性,通常用于胰島細(xì)胞的制備,或者需要維持受體完整性的細(xì)胞制備實(shí)驗(yàn)。 酶活力單位定義 在37℃,pH7.5 的條件下,5h內(nèi)水解膠原產(chǎn)生相當(dāng)于1μM L-亮氨的酶量定義為1個(gè)酶活力單位。 儲(chǔ)存條件:4℃,有效期兩年 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Collagenase II | 100mg | FS-X9752 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
脂1(LPIN1)英文名:LPIN1 BRPF3蛋白抗體包裝5g
脂聯(lián)受體1(ADIPOR1)英文名:ADIPOR1 BXDC1蛋白抗體包裝25g
脂解激活脂蛋白受體(LSR)英文名:LSR 腦蛋白44抗體包裝5g
脂肪細(xì)胞型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4)英文名:FABP4 腦蛋白44樣蛋白抗體包裝250mg
脂肪合(FASN)英文名:FASN 嗜乳脂蛋白樣2抗體包裝1g
脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)英文名:LBP 嗜乳脂蛋白樣8抗體包裝5g
脂多糖(LPS)英文名:LPS 嗜乳脂蛋白樣9抗體包裝10MG
脂蛋白脂(LIPD)英文名:LIPD BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝1g
脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂A2(LpPLA2)英文名:LpPLA2 腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體包裝25g
脂蛋白a(Lpa)英文名:Lpa Bcl2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝5g
整合β3(ITGβ3)英文名:ITGβ3 腦環(huán)核門控通道蛋白1抗體包裝25g
整合αM(ITGαM)英文名:ITGαM 癌易感基因復(fù)合蛋白4抗體包裝5g
整合α3(ITGα3)英文名:ITGα3 紡錘體檢查點(diǎn)蛋白抗體包裝1g
整合α1(ITGα1)英文名:ITGα1 有絲分裂檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白BubR1抗體包裝5g
真核翻譯起始因子2α激3(EIF2αK3)英文名:EIF2αK3 癌相關(guān)蛋白3抗體包裝5mg
整合樣金屬蛋白與凝血樣1蛋白抗體肌肉生長(zhǎng)抑制(MSTN)BMS-911543 是一種選擇性的 JAK2 抑制劑,IC50 值為 1.1 nM,對(duì) JAK1,JAK3 和 TYK2 的選擇性相對(duì)較弱,IC50 值分別為
膠原酶II型灰黃淺黃酵母 (S)-4-N-叔丁氧羰基-2-甲基哌軟骨糖蛋白39
釀酒酵母 乙叉降冰生烯潤(rùn)滑
水稻黃單胞(水稻白葉枯)* 2'-F-dU亞磷酰單體狀腺原
金霉鏈霉 吡唑-3-羧氧芐氨嘧啶
巨獸芽孢桿 2-氟腺三磷磷脂酰肌
三葉草根瘤 1-BOC-3-甲磺酰基氧甲基三磷腺
香菇 5--2,4-二氟苯三葉因子3
大麗輪枝霉 2-氟-4-甲氧基苯色氨酰tRNA合成
長(zhǎng)根小奧德蘑 2--3-甲甲酯色上皮衍生因子
里拉微球 2-基-4-性;通透性增加蛋白
釀酒酵母 2,6-二甲基-4-氟甲酯殺傷球蛋白樣受體
擬莖點(diǎn)霉 7-氟-6-硝基-4-羥基喹唑啉沙眼衣原體主要外膜蛋白
長(zhǎng)鹽土生古 2-乙基-2-金剛烷山梨脫氫
大腸埃希氏 2-基丁乙酯上皮膜蛋白2
蘇云金芽孢桿庫(kù)爾斯塔克亞種 叔丁基亞磺酰上皮膜抗原
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