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貨號 | FS-X10546 |
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產品介紹:
MK-4827tosylate是一種有效的PARP1和PARP2抑制劑,IC50值分別為3.8nM和2.1nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1038915-73-9 別名:Niraparib tosylate 純度:98.88% 分子量:492.59 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:PARP1和PARP2抑制劑
英文名稱:MK-4827 tosylate
產品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10546
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
Brenneria salicis小鼠抗血管內皮生長因子A抗體Anti-MAOA Antibody(PB0704)色羥化2(TPH2)
黃白馬杜拉放線菌粘著斑蛋白抗體Anti-MAP2 Antibody色羥化1(TPH1)
黑青霉嗜鉻顆粒轉運蛋白VAT1抗體Anti-MAOB Antibody(PB0705)三葉因子3(TFF3)
耶納農球菌維生D結合蛋白抗體Anti-MAP1LC3A Antibody三葉因子2(TFF2)
總狀毛霉血管非炎癥分子1抗體Anti-MAP2K2 Antibody三葉因子1(TFF1)
金黃隱球酵母血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體Anti-MAP2K1 Antibody三肽基肽Ⅰ(TPP1)
楊爛皮殼蕉孢菌血管內皮生長因子C型抗體Anti-MAP2K3 Antibody三磷腺(ATP)
杰丁塞伯林德納氏酵母囊泡相關膜蛋白3抗體Anti-MAP2K3 Antibody三磷肌(IP3)
蘇云金芽胞桿菌空泡分選蛋白18抗體Anti-MAP2K3 Antibody基鳥合1(TGS1)
炭疽芽胞桿菌磷化波形蛋白抗體Anti-MAP2K4 Antibody三合蛋白(TRDN)
蘇云金芽胞桿菌達爾可他亞種磷化波形蛋白抗體Anti-MAP2K4 Antibody軟骨粘附(CHAD)
屬鳥轉換因子VAV1抗體Anti-MAP2K7 Antibody軟骨糖蛋白39(GP39)
三葉草根瘤菌磷化鳥轉換因子VAV1抗體Anti-MAP2K6 Antibody軟骨凝集蛋白(CHODL)
栗疫病菌磷化鳥轉換因子VAV1抗體Anti-MAP2K6 Antibody軟骨關聯蛋白(CRTAP)
擬囊體側耳VWCE抗體Anti-MAP2K7 Antibody乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)
德氏乳桿菌德氏亞種牛痘病相關激1抗體(絲/蘇蛋白激VRK1)Anti-MAP3K1 Antibody絲抑蛋白(Maspin)
血清應答因子結合蛋白1抗體Rhizobacterdauci大鼠乳腺上皮細胞
頂端體相關蛋白7抗體Sphingomonaspolyaromaticivorans大鼠胰腺上皮細胞
14號染色體開放閱讀框174塞氏檸檬桿菌大鼠甲狀腺上皮細胞
分泌細胞凋亡相關蛋白1抗體Hyphomicrobiumzavarzinii大鼠胰島細胞
PARP1和PARP2抑制劑臭曲霉?jié)兎N 4-聯苯基-6-苯酯腺活化蛋白激
葡萄座腔 Fmoc-D-烯基甘肉堿棕櫚轉移1
解脂亞羅酵母 1,2-二乙烷(氘4)肉堿棕櫚轉移2
球狀枝孢 氨基七甘單甲過氧化物體增殖物激活受體γ
Bacillus safensis Satomi et al. (R)-3-氨基-3-苯基二?;视王;D移
啤酒酵母 2-羥甲基吡咯烷-1-羧丁酯甘油一酯轉?;?/span>
球孢白僵 1,2,3,4-丁烷四羧微粒體甘油三酯轉運蛋白大亞基
金針菇8號 4-氨基-3-乙基苯甲
麥克默多生孢八疊球 硫銀肉堿棕櫚轉移
樟疫霉 4--2-三氟甲基喹啉干擾
粘質沙雷氏 3-芐氧基苯甲端粒保護蛋白
柳屬半明小黑腐皮殼 硫代草乙酯游離狀腺原
大腸埃希 N6,2′-O-二丁?;?′,5′-環(huán)磷 鈉鹽游離甲狀腺
釀酒酵母 羰基氫三(三苯基膦)釕(II)促甲狀腺
小孢毛霉 (S,S)-DACH-苯基特羅斯特配體甲狀腺球蛋白抗體
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