AAO抗壞血酸氧化酶紫外分光光度法-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63283

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

規(guī)格：50管/48樣

檢測方法：紫外分光光度法

貨號：FS-01S63283
商品介紹：

測定意義

AAO是定位于植物細(xì)胞壁的糖蛋白，屬“藍(lán)銅氧化酶"家族。細(xì)胞壁內(nèi)的抗壞血酸和AAO與細(xì)胞壁的代謝和生長有著密切的聯(lián)系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質(zhì)膜上的細(xì)胞色素b還原，該過程中電子的跨膜運(yùn)輸能夠促進(jìn)細(xì)胞生長。

測定原理：

AAO可直接氧化AsA，通過測定AsA的氧化量，可計(jì)算得AAO活力。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備：

低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液器、研缽、冰、蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
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粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)試劑盒Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit8號染色體開放閱讀框4抗體

小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)試劑盒Human EREG(Proepiregulin) ELISA KitCD73抗體

小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)試劑盒Human ANXA2(Annexin A2) ELISA Kit軸突相關(guān)粘附分子抗體

小鼠腫瘤蛋白53(TP53)試劑盒Human ACR(Acrosin) ELISA Kit6型膠原蛋白α5抗體

小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)試劑盒Human ANGPTL2(Angiopoietin-related protein 2) ELISA Kit神經(jīng)粘附分子CALL抗體

小鼠酪(TRY)試劑盒Human TLR7(Toll-like receptor 7) ELISA Kit中性粒菌蛋白BP30抗體

小鼠泛蛋白(Ub)試劑盒Human EREG(Proepiregulin) ELISA Kit21號染色體開放閱讀框56抗體

小鼠高敏甲狀腺(u-T4)試劑盒Human TLR7(Toll-like receptor 7) ELISA KitTCD1抗體

小鼠高敏狀腺原(u-T3)試劑盒Human ACR(Acrosin) ELISA Kit角蛋白5抗體

小鼠尿激型纖溶原激活因子(PLAU/uPA)試劑盒Human PROM1(Prominin-1) ELISA Kit補(bǔ)體C9a抗體

小鼠肌酐(Cr)試劑盒 Human ANGPTL2(Angiopoietin-related protein 2) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框141抗體

小鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)試劑盒Human OGDH(2-oxoglutaRate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框160抗體

小鼠血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)試劑盒Human CCR4(C-C chemokine receptor type 4) ELISA Kit親環(huán)蛋白（親環(huán)）40抗體

小鼠血管內(nèi)皮生長因子D(VEGF-D)試劑盒Human IKBKB(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit beta) ELISA KitT調(diào)控相關(guān)蛋白抗體

小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)試劑盒Human ROMO1(Reactive oxygen species modulator 1) ELISA Kit突觸后蛋白CRIPT抗體
AAO抗壞血酸氧化酶紫外分光光度法熒光Cy3標(biāo)記豬胰島蛋白Anti-JDP2 Antibody小鼠蛋白激活受體-2（PAR2）elisa定量檢測試劑盒

(親和純化) 小鼠IgGAnti-JTB Antibody小鼠鳥基甲酰轉(zhuǎn)移（OCT）elisa定量檢測試劑盒

小鼠IgM (親和純化)Anti-JUNB Antibody小鼠相關(guān)血漿蛋白A（PAPP-A）elisa定量檢測試劑盒

(親和純化) 猴IgMAnti-JUN Antibody小鼠核RNA 輸出因子1（NXF1）elisa定量檢測試劑盒

Alexa Fluor 350標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-KAT2A Antibody小鼠蛋白酪磷O型受體（PTPRO）elisa定量檢測試劑盒

Alexa Fluor 555標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-KANK2 Antibody小鼠丙酮激M2型同工（M2-PK）elisa定量檢測試劑盒

兔抗小鼠IgA抗血清Anti-JUND Antibody小鼠環(huán)指蛋白4（RNF4）elisa定量檢測試劑盒

Alexa Fluor 647標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-KAT2B Antibody小鼠纖溶原激活物抑制因子1（PAI-1）elisa定量檢測試劑盒