PCR的反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時，容易發(fā)生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時間太長時，會出現(xiàn)Smear。
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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：人類白細胞抗原（HLA-B27）核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號：FS-P10475
產(chǎn)品分類：熒光PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開，分別測定熒光強度，根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內(nèi)標和引物，內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標與靶模板的長度不同，二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物，擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合，再加入抗di高辛或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結(jié)合物，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內(nèi)標，作出標準曲線，也可實現(xiàn)定量檢測目的。
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此，實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進入真正的指數(shù)擴增期（對數(shù)期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現(xiàn)性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
枝芽孢桿菌培養(yǎng)基: 471潛在的新種沉積物/箱式樣品提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

豌豆根瘤菌用于分類學和遺傳學研究，教學上也有應用，同時也篩選與豆科植物共生固氮的高效菌株用于實際。模式菌株: no根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0063生長條件: 28-30℃

肺炎鏈球菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0109提供形式: 其他安全等級: 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法

 -690℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

枯草芽胞桿菌培養(yǎng)基: 471環(huán)境微生物研究，抗菌活性物質(zhì)研究水樣/海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

 79845　d　1,6模式菌株: no種屬: Salmonella│dugbe提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃

卵孢白僵菌生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

白口殼梭孢菌代謝產(chǎn)物模式菌株: no枝條提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 25

 ivcas7.00887培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no種屬: Bacillus│thuringiensis提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28-32℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

黃曲霉培養(yǎng)基: 14模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法

 -691℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

 AS2.361培養(yǎng)基: 13飼料酵母種屬: GeotrichumcandidumLink安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃

鈍齒棒桿菌培養(yǎng)基: 0032L-白氨提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

平菇PL-27生長條件: 25培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法

柔嫩艾美耳球蟲用于科研模式菌株: no雞糞便提供形式: 其他安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37

蠟狀芽孢桿菌生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0002提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

N,N'-乙撐雙硬脂酰胺  2--4-羥基  4-基-2-甲基可尼汀

4--2-硝基甲  6-硝基藜蘆  原卟啉

2-  左西孟旦  2,2′-亞甲基雙[(4，s)-4-叔丁基-2-噁唑啉]

3-甲基異  3--6-甲基噠嗪  3-溴

Antimony triacetate  醋銻  6923-52-0

ANTIMONY PENTAFLUORIDE  五化銻  7783-70-2

Tungsten trioxide  三氧化鎢  1314-35-8

cis-1,4-Dichloro-2-butene  順-1,4-二-2-丁烯  1476-11-5

大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA試劑盒 ，英文名： f-βCG ELISA Kit

人免疫球蛋白j鏈(Ig-j)ELISA檢測試劑盒Humanimmunoglubinjoiningchain,Ig-jELISAKit 96T/48T

大鼠白介素15(IL-15)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 15,IL-15 ELISA KIT

CLIAKitfoBAELISAKit大鼠總膽汁規(guī)格：48T/96T

人體IL-17基因甲基化檢測試劑盒20次

ELISAKitAPF人抗核周因子抗體規(guī)格：48T/96T
人類白細胞抗原（HLA-B27）核酸檢測試劑盒甲基橙皮苷11013-97-1中文別名：甲基橙皮甙，3-甲基橙皮苷  

英文名：Methyl hesperidin  

登錄號：11013-97-1

分子式：C29H38O15

分子量：626

分子結(jié)構(gòu)：

外觀：黃色或淡黃色結(jié)晶性粉末

規(guī)格：20mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源：橙皮苷（橙皮甙）甲基化衍生而來

溶解性：乎不溶于水(難溶于 水)，不溶于、、和，微溶于 和乙醇，易溶于性溶液、、、熱醋、熱和熱乙醇。

熔點：251～252℃

藥理藥效：本品為水溶性多種二氫黃型甲基橙皮苷的混合物。具有維生素P一樣的效能，可增強維生素C的作用，并有較強的抗病和抗菌作用，大劑量能抑制流感病的繁殖；能抑制導致皮膚變黑的酪氨酶的作用，可用于治療黑斑、雀斑等皮膚病。具有維持血管正常通透性，提高毛細血管抵抗力，增強毛細血管的彈性與韌性，防止和治療毛細血管出血，牙齦出血等。具有與橙皮苷同樣的藥理作用、能加強毛細血管抵抗力，使毛細血管滲透正常和防止動脈硬化所引起的血管紊亂；與維生素C配合使用療效更佳?？捎糜诒浅鲅?、視網(wǎng)膜出血、齒齦、齒槽出血。胃腸道出血，痔出血等，以及手術(shù)前或手術(shù)后的出血預防和治療。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年