特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。

PCR技術(shù)的定量原理：
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
實(shí)時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
frozen名稱: 山羊皮膚來源 10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..名稱: 人腎上腺皮質(zhì)腺癌；NCI-H295R 10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..名稱: 人上皮；SVCT 10%FBS+2mMGlutamine+5μg/mlHydrocortisone+10μg/mlInsulin

Ascosphaera larvis Bissett名稱: 人胰島融合；1.1B4 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS+2mMGlutamine+5μg/mlHydrocortisone+10μg/mlInsulin

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..名稱: 人淋巴瘤；H33HJ-A1 10%FBS

Aliivibrio fischeri (Beijerinck) Urbanczyk ..名稱: 人慢性髓系白血病；K562-AZQR RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Phialophora melinii (Nannfeldt) Conant, ana ..名稱: 人肺鱗狀癌；HARA-B 10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..名稱: 人膀胱移行瘤；RT4 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；2mML-glutamine

Penicillium aeneum Smith, anamorph名稱: 人大淋巴瘤；SU-DHL-6 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；2mML-glutamine

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..名稱: 人骨肉瘤；HOS 10%FBS

frozen名稱: 小鼠精原；GC-1spg DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；2mML-glutamine

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..名稱: 小鼠精母；GC-2spg（ts) DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；2mML-glutamine

Ureaplasma parvum Robertson et al.名稱: 人骨肉瘤；MNNG/HOSC1#5 10%FBS

Trametes cubensis (Montagne) Saccardo, tele ..名稱: 人口腔鱗狀上皮癌；H157 10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..名稱: 大鼠正常氣管上皮；RNTEC/HL-025RatNormalTrachealEpithelialCellsRNTEC/HL-025 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Mus musculus (B cell); Mus musculus (myeloma ..名稱: 大鼠正常胸腺上皮；RNTEC/HL-026RatNormalThymusEpithelialCellsRNTEC/HL-026 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
禽白血病病毒核酸檢測試劑盒人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒vWFELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒VZV-IgGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒VZVIgMELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒WGAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒XCR1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒Zn-MTELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒ZRELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒α1-AGPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。