當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 淋巴細(xì)胞分離液1.077
貨號(hào) | FS-X9747 |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Lymphocyte Separation Medium 1.077 | 100ml | FS-X9747 |
產(chǎn)品介紹:
淋巴細(xì)胞分離液(Lymphocyte Separation Medium,簡稱LSM)是一種無菌的即用型分離液,基于B?yum的Ficoll-甲泛影鈉溶液做過一些改良,使得操作簡單快速且分離效率更高。每100 ml淋巴細(xì)胞分離液中含有6.2 g 聚蔗糖(Ficoll)和9.4 g 泛影鈉,20℃下的密度為1.0770-1.0800 g/ml。不僅適用于外周血淋巴細(xì)胞,也可分離其他組織來源的淋巴細(xì)胞,包括臍帶血和骨髓細(xì)胞。 工作原理 去纖維蛋白或肝素化人血以1:1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶稀釋,加在分離液上層,之后低速離心30 min。在離心過程中,差速遷移使其終形成幾個(gè)細(xì)胞分層。聚集在管底的顆粒主要是紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞,通過梯度遷移至管底。根據(jù)其密度的大小,淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞如單核細(xì)胞,以及血小板分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細(xì)胞可以通過吸取分界層溶液回收,并通過進(jìn)一步清洗來去除血小板,LSM和血漿。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
E-鈣粘附分子(E-Cadherin)英文名:E-Cadherin 轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體Brn3α包裝5g
CXC趨化因子配體1(CXCL1)英文名:CXCL1 骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體包裝25g
CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)英文名:FKN/CX3CL1 腦鈉抗體包裝5g
CD80分子(CD80/B7-1)英文名:CD80/B7-1 骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體包裝100g
CD30配體(sCD30 L)英文名:sCD30 L 抑凋亡基因bag1抗體包裝25g
B細(xì)胞活化因子(BAFF/CD257/TNFSF13B)英文名:BAFF/CD257/TNFSF13B 蛙皮受體3抗體包裝5g
10kDa干擾γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10/CXCL10)英文名:IP-10/CXCL10 骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體包裝1g
10kDa干擾γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10)英文名:IP-10 骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體包裝25g
左右決定因子2(LEFTY2)英文名:LEFTY2 磷化Bcl-2抗體包裝5g
左右決定因子1(LEFTY1)英文名:LEFTY1 磷化Bcl-2抗體包裝100g
組織因子通道抑制因子(TFPI)英文名:TFPI 磷化Bcl-xL蛋白抗體包裝25g
組織因子(TF)英文名:TF 神經(jīng)母瘤相關(guān)蛋白ARID3B抗體包裝5g
組織型纖溶原激活因子(tPA)英文名:tPA 微管蛋白β4抗體包裝1g
組織金屬蛋白抑制因子4(TIMP4)英文名:TIMP4 霍亂腸β鏈抗體包裝5g
組織金屬蛋白抑制因子3(TIMP3)英文名:TIMP3 β晶體蛋白B1抗體包裝1g
AHNAK核蛋白2抗體干擾α16(IFNα16)LDN193189 是一種選擇性的 BMP I 型受體抑制劑,抑制 ALK2 和 ALK3 的 IC50 分別為 5 nM 和 30 nM。對 ALK4,ALK
淋巴細(xì)胞分離液1.077芽枝狀枝孢 3-溴-2-氟苯甲葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白-78
賴氏毛殼 4-溴-1-萘甲葡萄糖氧化
鵝膏屬 亞甲基三苯基膦葡萄糖依賴性胰島釋放多肽
清酒乳桿清酒亞種* 原三乙酯葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1
匍枝根霉 2-氟-5-葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2
潮濕纖維單胞 1,1,2,2-四氟乙基-2,2,3,3-四氟基前白蛋白
黑木耳 亞甲基二磷四異酯前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶9
溶厄氏 碳二(2-吡啶)酯前列環(huán)
黑曲霉 2-吡啶基乙甲酯前列腺干抗原
多主葡萄殼 3--5-硝苯前列腺D2
盤孢屬 新特姆前列腺E1
土曲霉原變種 2-溴甲基-4-基甲酯前列腺E2
根瘤 4-甲基-3-庚, 赤式 +蘇式前列腺F2α
淡紫灰鏈霉 3-正丁氧基前列腺F2α受體
假絲酵母屬 四氫吡喃-4,4-二羧二甲酯前列腺性磷
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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